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申请/专利权人：西北农林科技大学
摘要：本发明公开了一种通过基因编辑ClSPL创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClSPL创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPRCas9技术，对西瓜ClSPL基因进行靶向编辑，使其孢子母细胞无法分化，基因功能缺失，雌雄配子不育，双受精失败，无种子产生，从而创制二倍体无籽西瓜。通过本发明方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌雄配子不育，营养生长阶段均无明显表型变化，无籽表型可以通过ClsplRFClSPLRF杂合编辑的植株无限繁殖。该方法具有简单易行、效率高、成本低和周期短等优点。
主权项：1.一种双靶位敲除载体，其特征在于，包括gRNA1和gRNA2，或gRNA3和gRNA4双靶点；所述gRNA1、gRNA2、gRNA3、gRNA4序列如下：gRNA1：5’-TGGCGACTCCAATCCACAC-3’；SEQIDNO.3；gRNA2：5’-CGCCCAGCTCGAACGATTG-3’；SEQIDNO.4；gRNA3：5’-AACCGCCGCAGAGAGGCCT-3’；SEQIDNO.5；gRNA4：5’-CCTGCCGCCGCACCGCCAA-3’；SEQIDNO.6。
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百度查询： 西北农林科技大学 一种通过基因编辑ClSPL创制二倍体无籽西瓜的方法
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