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申请/专利权人：东莞市东南部中心医院
摘要：本发明涉及再生医学领域，具体涉及磁纳米化趋化因子SDF‑1的制备方法。本发明的磁纳米化趋化因子SDF‑1的制备方法，包括以下步骤：制备重组质粒；制备重组菌株，并诱导重组菌株表达目的蛋白；利用表面修饰链霉亲合素的磁性纳米颗粒，制备磁纳米化SDF‑1。本发明制备得到带有生物素标签的基质细胞衍生因子SDF‑1，借助大肠杆菌表达目的蛋白，细菌培养简单易操作，而且成本低。利用亲和层吸方法一步纯化得到重组SDF‑1蛋白，操作简单，成本低，目的蛋白纯度高；本发明制备得到磁纳米化趋化因子SDF‑1，其搭载效率高，具有生物学活性，生物相容性好，可以被外部磁场操控，具有良好的生物学应用前景。
主权项：1.一种磁纳米化趋化因子SDF-1的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1制备重组质粒birAbap-sdf-1-pCDFDuet-1；2制备重组菌株，对重组菌株进行诱导表达，得到诱导后的菌液；3对步骤2得到的菌液进行纯化，得到纯化后蛋白样品，对所述纯化后蛋白样品进行透析和复性，得到目的蛋白BAPBiotin-SDF-1；4向磁性纳米颗粒溶液中加入目的蛋白BAPBiotin-SDF-1，超声后，进行孵育，得到混合体系；使用磁力架对所述混合体系进行吸附，弃上清后，加入蛋白保存液进行洗涤，加入蛋白保存液进行重悬，得到所述磁纳米化趋化因子MNPs-SDF-1；所述磁性纳米颗粒溶液为表面修饰链霉亲合素的磁性纳米颗粒SA-MNPs，加入目的蛋白BAPBiotin-SDF-1的体积为所述磁性纳米颗粒溶液体积的5～15倍；所述孵育条件为2～40℃、50～250rpm，所述孵育时间为0.1～3h；所述蛋白保存液为TENG；所述TENG由以下成分组成：0.05MTris-base，0.5mMEDTA，0.05M氯化钠，5％甘油。
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权利要求：
百度查询： 东莞市东南部中心医院 磁纳米化趋化因子SDF-1及其制备方法和应用
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