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申请/专利权人:河北省农林科学院经济作物研究所
摘要:本发明涉及一种生物技术育种领域,具体涉及一种芦笋与长花天门冬种间杂交获取杂交后代的方法,具体包括如下步骤:母本选用芦笋栽培品种的雌株,父本选用长花天门冬的雄株;将芦笋栽培品种的灭活花粉与长花天门冬的花粉混合,制成花粉悬浮液;在高温、高CO2环境下人工授粉,进行种间杂交;选取授粉后嫩果进行幼胚预培养期、幼胚二次培养期、幼苗培养期获得杂交植株。本发明克服了芦笋与长花天门冬种间杂交时,因远缘杂交不亲和、幼胚败育等因素难以获得杂种植株的障碍;杂交后代继承了亲本的部分优良性状:植株矮化、抗病性强、抗逆性强。本发明可有效提高芦笋种间杂交育种效率,加快芦笋新品种选育进程。
主权项:1.一种芦笋与长花天门冬种间杂交后代的获得方法,其特征在于:具体包括以下步骤:S1.亲本的选培母本选用栽培芦笋品种,父本选用长花天门冬;S2.花粉悬浮液的制备将与母本相同品种的雄株花粉灭活和父本雄株花粉混合,加入水杨酸溶液混合制成花粉悬浮液;S2中所述灭活温度为50℃~60℃,灭活时间10min,所述与母本相同品种的雄株花粉与父本雄株花粉的体积比为1:1,所述水杨酸的质量分数为0.1%,所述花粉悬浮液中花粉质量百分比为1.0~2.0%,保存温度为低于4℃;S3.母本预处理及授粉先将母本进行预处理,再将花粉悬浮液涂抹到母本雌花柱头上,随后用授粉袋套住进行隔离培养;S3中所述预处理的条件为,CO2浓度为1000~1200ppm,光照强度为2500~3000Lux,温度为35~40℃,时间0.5~1h;所述培养条件为,时间为6~8h,随后移至温室中管理,7~10d后摘除授粉袋;S4.胚挽救将S3得到的幼胚经过幼胚预培养期、幼胚二次培养期和幼苗培养期得到芦笋与长花天门冬种间杂交后代;所述幼胚二次培养期的培养基为12MS培养基,添加6-苄氨基嘌呤1.5~2.0mgL,激动素0.1~0.2mgL,吲哚-3-乙酸0.1~0.2mgL,蔗糖30gL,琼脂5gL,培养基pH值5.8,培养时间为10~15d;所述幼苗培养期的培养基为MS培养基,添加6-苄氨基嘌呤1.5~2.0mgL,1-萘乙酸0.5~1.0mgL,吲哚-3-乙酸0.1~0.2mgL,玉米素0.1~0.2mgL,蔗糖30gL,琼脂5gL,培养基pH值5.8,培养时间为40~50d。
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