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一种无菌苗来源植物细胞及其制备方法 

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申请/专利权人:上海珈凯生物股份有限公司

摘要:本发明公开了一种无菌苗来源植物细胞的制备方法,包括以下步骤:A、将植物种子去除种壳后进行消毒处理,然后接种于培养基上进行无菌培养;B、将步骤A培养获得的根伸长受到抑制的植物无菌苗切取根尖,并去除根冠后接种于培养基中进行培养,即得无菌苗来源植物细胞。本发明方法采用无菌苗为原材料,避免了植物内生菌感染的问题;通过在无菌苗培育阶段,对根尖干细胞进行诱导培养,同时抑制根的分化,进而避免了渗透剂的处理。本发明制备的无菌苗来源植物细胞悬浮后多以单细胞或者2‑3个细胞的小细胞团的形式存在,单细胞率高达95%,更利于后期进一步的增殖培养和放大生产。

主权项:1.一种无菌苗来源植物细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:A、将植物种子去除种壳后进行消毒处理,然后接种于培养基上进行无菌培养;B、将步骤A培养获得的根伸长受到抑制的植物无菌苗切取根尖,并去除根冠后接种于培养基中进行培养,即得无菌苗来源植物细胞;所述植物种子为人参种子;步骤A中,所述培养基为MS培养基,培养条件为:温度22~25℃,湿度30~50%rH,光照度60~80%,12~16h光培养12~8h暗培养,培养15~40d;所述MS培养基中包含以下浓度的各组分:蔗糖10~30gl、琼脂粉4~10gl、L-抗坏血酸50~100mgl、柠檬酸100~150mgl、IAA0.5~10mgl、IBA0.5~10mgl;步骤B中,所述培养采用的培养基为第一B5培养基,培养条件为:培养温度22~30℃,黑暗培养,培养20~40d;所述第一B5培养基中包含以下浓度的各组分:蔗糖10~30gl、琼脂粉4~10gl、L-抗坏血酸50~100mgl、柠檬酸100~150mgl、IAA0.5~10mgl、IBA0.5~10mgl。

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