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一种喜树碱10-羟化酶及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:中国科学院成都生物研究所

摘要:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种喜树碱10‑羟化酶及其制备方法和应用。本发明采用CRISPRCas9基因编辑系统构建了工程菌株;采用定向进化技术,对如SEQNOID:1所示的喜树碱10‑羟化酶进行突变,获得了一系列喜树碱10‑羟化酶突变体;将喜树碱10‑羟化酶及其突变株的编码基因分别转入上述未编辑和编辑后的底盘菌株,经培养、发酵,添加喜树碱,进行生物转化及条件优化,得到10‑羟基喜树碱。本发明显著提升了利用喜树碱10‑羟化酶生物合成10‑羟基喜树碱的转化率。本发明还优化了喜树碱10‑羟化酶催化条件,进一步提升了催化转化率,为10‑羟基喜树碱的绿色、高效制备提供了新催化剂和新方案,是一种绿色、高效、高转化率的10‑羟基喜树碱制备新方法。

主权项:1.喜树碱10-羟化酶突变体,其特征在于:将野生型喜树碱10-羟化酶的第483位的亮氨酸突变为丙氨酸,野生型喜树碱10-羟化酶的氨基酸序列如SEQNOID:1所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国科学院成都生物研究所 一种喜树碱10-羟化酶及其制备方法和应用

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