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申请/专利权人:中国人民解放军军事科学院防化研究院
摘要:本发明涉及生物技术领域,具体地涉及一种人源性抗菌肽LL‑37重组芽胞细菌纤维素膜及制备方法。本发明采用重组抗菌肽LL‑37枯草芽胞杆菌与木醋杆菌共培养,生成抗菌肽LL‑37重组芽胞细菌纤维素膜,并对其进行表征,结果证实重组芽胞成功的掺入细菌纤维素膜中。本发明明确重组抗菌肽LL‑37枯草芽胞杆菌与木醋杆菌共培养方法,获得抗菌肽LL‑37重组芽胞细菌纤维素膜,在制作抗菌膜等实际应方面具有潜在的应用价值。
主权项:1.一种抗菌肽LL-37重组芽胞细菌纤维素膜的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:步骤一、将重组抗菌肽LL37枯草芽胞杆菌pHY300PLK-cotg-LL37-6hisDB104进行蛋白表达和生胞培养:将重组pHY300PLK-cotg-LL37-6hisDB104菌株转接到含20~50μgmL四环素的LB培养基中,在25~42℃恒温下震荡培养;震荡培养结束后,转接于含20~50μgmL四环素的DSM培养基,在25~42℃恒温下震荡进行生胞培养,得到重组LL37芽胞;所述重组pHY300PLK-cotg-LL37-6hisDB104菌株为转入重组载体pHY300PLK-cotg-LL37-6his的B.subtilisDB104细菌;所述重组载体pHY300PLK-cotg-LL37-6his为含有cotg-LL37-6his基因片段的质粒pHY300PLK;步骤二、抗菌肽LL37重组芽胞与木醋杆菌共培养:以DSM培养基与木醋杆菌HS培养基混合,形成共生培养基;向共生培养基中接种木醋杆菌种子液,并向共生培养基中添加步骤一所得的重组LL37芽胞;摇匀后25~42℃静置培养,得到嵌合生物活性材料人源性抗菌肽LL37重组芽胞细菌纤维素膜。
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