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申请/专利权人：武汉德翊环境科技有限公司

摘要：本发明公开了一种沉水植物竹叶眼子菜的人工种子制备方法，包括如下步骤：1外植体的获取与灭菌；2不定芽的诱导与增殖；3不定芽的增殖；4海藻酸钠凝胶液包埋，包埋液的配方为2％海藻酸钠+MS4.74gL+1.5％蔗糖+IBA0.5mgL+NAA0.1mgL+0.3％多菌灵+头孢霉素200mgL+0.1％活性碳+石英砂少许；5CaCl2溶液中进行固化反应；6无菌水漂洗终止反应，即可获得竹叶眼子菜人工种子。本发明结合了组织培养的高效性与规模化人工种子包埋的便捷性，培育出的种苗具有生长势强、生根较快、成活率高等优点，且工艺流程简单，不受季节影响，解决了水体生态系统重建过程中沉水植物种苗来源问题，避免了对种源地植物资源造成的破坏。

主权项：1.一种沉水植物竹叶眼子菜的人工种子制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1外植体的获取与灭菌：取生长健壮的竹叶眼子菜茎段，去除叶片，用流水冲洗20～30min，再用75％的酒精浸泡30s，无菌水冲洗2次，然后用0.1％的氯化汞浸泡3～5min，无菌水冲洗4-5次；2不定芽的诱导：将经步骤1处理的无菌外植体接入不定芽诱导培养基中，培养15～20天；不定芽诱导培养基为：MS4.74gL+3％蔗糖+0.7％琼脂+6-BA1mgL+IBA0.5mgL；培养瓶中加无菌水至瓶体34；培养温度为25℃，光照强度为2000lux，光周期为1212h光照黑暗；3不定芽的增殖：将经步骤2培养的竹叶眼子菜培养物切成2～3厘米带有腋芽的茎段，转接于增殖培养基，培养15～20天长成竹叶眼子菜幼苗；增殖培养基为：MS4.74gL+3％蔗糖+0.7％琼脂+6-BA1mgL+NAA0.1mgL；培养瓶中加无菌水至瓶体34，培养条件同步骤2；4海藻酸钠凝胶液包埋：将经步骤3培养的竹叶眼子菜培养物切成3～4厘米带有节的茎段，保留部分幼叶，置于模具中用海藻酸钠包埋液进行包埋；包埋液的配方为2％海藻酸钠+MS4.74gL+1.5％蔗糖+IBA0.5mgL+NAA0.1mgL+0.3％多菌灵+头孢霉素200mgL+0.1％活性碳+石英砂少许；5CaCl2溶液中进行固化反应：在模具中倒入2％CaCl2溶液就进行固化反应15-20min；6无菌水漂洗终止反应：固化反应后用自来水清洗3次，终止反应，即得沉水植物竹叶眼子菜的人工种子；最后放入自来水中，同时进行生根和炼苗培养，培养温度为25℃，光照强度为2000lux，光周期为1212h光照黑暗，10天后长出新根，突破种皮，植株逐渐长大，完成转株。

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