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申请/专利权人：罗火生

摘要：本发明公开了一种纸片载体固定床培养细胞传代罐传罐放大方法，是基于纸片载体固定床反应器实现的细胞传代放大方法；所述纸片载体固定床反应器包含反应罐及设置在反应罐内的纸片载体固定床，所述纸片载体固定床包含一个环形上网板、一个可向下折叠式环形下网板、一个中间筒及两个固定床下网板操作杆，环形上网板及可向下折叠式环形下网板分设在中间筒的上下部，两个固定床下网板操作杆分设在中间筒的左右侧，用于控制纸片载体固定床的可向下折叠式环形下网板向下开启，使装载在纸片载体固定床中的纸片载体落入到反应罐底进行细胞在线消化，从而实现细胞传代罐传罐放大培养。本发明优点是：工艺简单可控，耗时短，效率高，污染风险低，细胞质量可控。

主权项：1.一种纸片载体固定床培养细胞传代罐传罐放大方法，其特征在于，所述细胞传代罐传罐放大方法是基于纸片载体固定床反应器1实现的细胞传代放大方法；所述纸片载体固定床反应器1包含反应罐1.1及设置在所述反应罐1.1内的纸片载体固定床1.2，所述纸片载体固定床1.2包含一个环形上网板1.2.1、一个可向下折叠式环形下网板1.2.2、一个中间筒1.2.3及两个固定床下网板操作杆1.2.4，所述环形上网板1.2.1及可向下折叠式环形下网板1.2.2分设在所述中间筒1.2.3的上、下部，所述的两个固定床下网板操作杆1.2.4分设在所述中间筒1.2.3的左、右侧，并均与所述环形上网板1.2.1及可向下折叠式环形下网板1.2.2呈可转动式卡接配合；其中，可向下折叠式环形下网板1.2.2由两个可向下开启的半环形下网板1.2.2a通过两个固定合页1.2.2b拼接而成，且每个固定合页1.2.2b均与中间筒1.2.3下部固定连接，每个可向下开启的半环形下网板1.2.2a均与一个固定床下网板操作杆1.2.4的下端呈可转动式卡接配合，每个固定床下网板操作杆1.2.4的上端均与环形上网板1.2.1呈可转动式卡接配合；所述纸片载体固定床培养细胞传代罐传罐放大方法通过纸片载体固定床反应器1实现的细胞传代放大方法具体包含有如下步骤：S1、向纸片载体固定床反应器1的反应罐1.1内加入PBS缓冲液到指定位置，并保压30分钟；S2、当纸片载体固定床反应器1的反应罐1.1在保压30分钟不掉压后，打开纸片载体固定床反应器1自带的灭菌程序，进行灭菌操作，待灭菌完成后，将纸片载体固定床反应器1自然降温至常温备用；S3、打开纸片载体固定床反应器1的罐底阀1.11，将反应罐1.1内的PBS缓冲液排出，并通过进液管1.7向反应罐1.1中加入细胞生长液，与此同时，在纸片载体固定床反应器控制器1.17中设置好相应的参数进行预培养；S4、待预培养合格后，先将反应罐1.1内进行预培养的细胞生长液通过罐底阀1.11排出，然后通过进液管1.7向反应罐1.1中加入新的细胞生长液和细胞悬液，接着启动磁力搅拌器1.14工作，通过磁力搅拌器1.14将新加入的细胞生长液和细胞悬液混匀及细胞接种，与此同时，启动在线细胞计数器1.16工作和在纸片载体固定床反应器控制器1.17中设置好相应的参数进行细胞正式培养；S5、当在线细胞计数器1.16计量到反应罐1.1内细胞数达到工艺要求时，先将反应罐1.1内温度降至常温并排掉细胞生长液，然后再向反应罐1.1内底部加入消化液，接着再旋转两个固定床下网板操作杆1.2.4使填充在纸片载体固定床1.2内的纸片载体2落入到反应罐1.1罐底消化液中进行细胞消化处理；S6、待消化完成后，先通过罐底阀1.11将反应罐1.1罐底的消化液排出，然后通过进液管1.7向反应罐1.1中加入新的细胞生长液，接着再启动磁力搅拌器1.14工作，通过磁力搅拌器1.14搅拌落入到反应罐1.1罐底的纸片载体2及液体，使依附在纸片载体2上的细胞从纸片载体2上脱离，最后将从纸片载体2上脱离的细胞收集到下一级生物反应器中进行传代放大培养。

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