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申请/专利权人：江苏汇先医药技术有限公司
摘要：本发明涉及荧光免疫检测技术领域，公开了一种提升灵敏度的白介素6荧光免疫检测方法，包括以下步骤：试剂准备：1磁珠包被IL‑6单克隆抗体：磁珠集磁并清洗两次，加入EDC，旋转仪上活化，集磁并清洗两次后，加入抗体，旋转仪上反应，再加入封闭液，旋转仪上封闭；组后清洗液清洗，得到反应物，调整反应物浓度，得到试剂1。本发明反应体系使用目前最亮的荧光素‑‑藻红蛋白简称PE作为检测底物，并采用SAPE与BIO‑PE循环反应，在使单个抗体携带更多的荧光分子供识别，从而提高试剂盒的灵敏度；反应最终物质使用流式细胞仪检测，在流式细胞仪的激光光器照射下依次识别单个磁珠及激发磁珠表面的SAPE‑PE，类似单分子技术，从而提高试剂盒的灵敏度。
主权项：1.一种提升灵敏度的白介素6荧光免疫检测方法，其特征在于：包括以下步骤：试剂准备：1磁珠包被IL-6单克隆抗体：磁珠集磁并清洗两次，加入EDC，旋转仪上活化，集磁并清洗两次后，加入抗体，旋转仪上反应，再加入封闭液，旋转仪上封闭；组后清洗液清洗，得到反应物，调整反应物浓度，得到试剂1；2生物素标记IL-6单克隆抗体：生物素与抗体混合，室温反应，反应物经脱盐柱纯化得到标记物，调整标记物浓度，得到试剂2；3制备SAPE-PE：首先将生物素与PE混合制备BIO-PE，然后将SAPE和BIO-PE稀释后混合反应，得到SAPE-PE，调整浓度后得到试剂3；检测：取96孔酶标板，每孔加入IL-6抗原+试剂1+试剂2，于孵育箱中孵育；磁吸，弃上清，使用PBST清洗液清洗三次，再加入试剂3；磁吸，弃上清，使用PBST清洗液清洗三次；每孔加入PBS重悬磁珠，在流式细胞仪上上样检测。
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权利要求：
百度查询： 江苏汇先医药技术有限公司 一种提升灵敏度的白介素6荧光免疫检测方法
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