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一种荧光原位杂交的组合物、荧光原位杂交探针试剂盒及其应用 

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申请/专利权人:南方医科大学珠江医院

摘要:本发明提供了一种荧光原位杂交的组合物、荧光原位杂交探针试剂盒及其应用,包括杂交探针、极性非质子溶剂、羧酸酰胺、溶菌酶、硫酸葡聚糖、异硫氰酸胍、pH7.3~7.5的磷酸缓冲液、以及SSC缓冲液;所述杂交探针1的序列为5’‑FAM‑CGGCTTCGCTGCCCTTTGTTCTGCCCATTGTA‑3’;所述杂交探针2的序列为5′‑NovaFluorBlue610‑30SDyeTACCGCCCTATTCGAACGGTAC‑3′;所述杂交探针3的序列为5′‑Cy3GCAGCCACCCGTAGGTGT‑3′。本发明的荧光原位杂交的组合物、荧光原位杂交探针试剂盒能够同时检测地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌以及解淀粉芽孢杆菌,并将其彼此区分开。

主权项:1.一种荧光原位杂交的组合物,其特征在于,所述组合物包括杂交探针、极性非质子溶剂、羧酸酰胺、溶菌酶、硫酸葡聚糖、异硫氰酸胍、pH7.3~7.5的磷酸缓冲液、以及SSC缓冲液;所述杂交探针包括杂交探针1、杂交探针2和杂交探针3,其中,杂交探针1、杂交探针2和杂交探针3的质量比例为1:(0.8~1.5):(0.8~1.5);所述杂交探针1的序列为5’-FAM-CGGCTTCGCTGCCCTTTGTTCTGCCCATTGTA-3’;所述杂交探针2的序列为5′−NovaFluorBlue610-30SDyeTACCGCCCTATTCGAACGGTAC-3′;所述杂交探针3的序列为5′−Cy3GCAGCCACCCGTAGGTGT-3′;所述极性非质子溶剂、羧酸酰胺、硫酸葡聚糖的体积比为(7~25):(10~20):(10~20);所述溶菌酶的浓度为5~15mgmL,所述异硫氰酸胍的浓度为0.8~1.2moLL;所述组合物中各杂交探针的浓度均为0.8~1.5μmoLL;pH7.3~7.5的磷酸缓冲液的体积为极性非质子溶剂、羧酸酰胺和硫酸葡聚糖总体积的2~15倍;所述极性非质子溶剂为碳酸亚乙酯或碳酸乙二酯;所述羧酸酰胺为甲酰胺。

全文数据:

权利要求:

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