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申请/专利权人：中国林业科学研究院林业研究所

摘要：本发明公开了一种同位素13C‑15N标记内生真菌与宿主植物互惠共生的方法和装置。本发明是关于植物‑微生物共生关系研究的方法和装置，它属于一种通过同位素标记试验定量分析微生物促进宿主吸收矿质元素的方法。本发明以不同孔径的尼龙网和有机玻璃板组装的一体化装置为工具标记同位素13C‑15N来定量分析内生真菌与宿主植物互惠共生关系。本方法充分利用了一体化装置快速、准确以及可控性强的特点，在同一棵树体中进行多种同位素同时标记，快速揭示了内生真菌与宿主植物间的相互作用。本发明实现了内生真菌与宿主植物互惠共生关系研究的一体化标记装置，解决了定量分析内生真菌功能特性的问题，大大提高了同位素标记效率和标记精度。

主权项：1.一种同位素13C-15N标记内生真菌与宿主植物互惠共生的装置，包括：箱体，所述箱体内部从左到右依次设置N标记室、中间部分、N标记室；所述中间部分从前到后依次设置具有标记的真菌室I、植物生长室、具有标记的真菌室II；两个所述N标记室分别均匀分为4个N标记室，即NⅠ,NⅡ,NⅢ,NⅣ，NⅠ′,NⅡ′,NⅢ′,NⅣ′；隔离层，设于植物生长室与N标记室和具有标记的真菌室I、II及N标记室与具有标记的真菌室I、II的接触面，用于分隔N标记室、具有标记的真菌室和植物生长室；所述隔离层包括：有机玻璃板、2mm尼龙网或20μm尼龙网；所述有机玻璃板设于所述箱体底部至高15cm以上的隔离层，所述2mm尼龙网和20μm尼龙网，设于所述箱体底部至高15cm以下的隔离层；所述2mm尼龙网分割的N标记室（NⅢ,NⅣ,NⅠ′,NⅡ′）、具有标记的真菌室Ⅱ可以通过真菌菌丝和植物细根，因此，2mm尼龙网分割的N标记室中的同位素15N可通过内生真菌和植物细根吸收；但是20μm尼龙网分割的N标记室（NⅠ,NⅡ,NⅢ′,NⅣ′）、具有标记的真菌室Ⅰ只能通过真菌菌丝，因此，20μm尼龙网分割的N标记室中的同位素15N只能通过内生真菌吸收； 13C气体反应发生装置，设于所述植物生长室，用于生成13C-CO2气体进行13C标记；所述13C气体反应发生装置包括：带胶塞废液排放管，用于排放反应废液；13C-CO2反应杯，用于盛放13C-Na2CO3溶液；带刻度三通阀滴定管，设于13C-CO2反应杯的上方，所述带刻度三通阀滴定管中的三通阀设于箱体顶部，通过三通阀向所述13C-CO2反应杯中注入HCl溶液与13C-Na2CO3溶液反应生成13C-CO2气体进行13C标记；气体传感器，设于所述植物生长室，用于监测13C标记前后及标记过程中的CO2和O2浓度；日光灯，设于植物生长室；带胶塞广口瓶组件，设于植物生长室，用于吸收13C标记前后的CO2气体；所述带胶塞广口瓶组件包括：带胶塞广口瓶，用于盛放碱性溶液充分吸收植物生长室中的CO2气体；挂钩，设于植物生长室的顶部，用于固定带胶塞广口瓶中的胶塞；温湿度计，设于植物生长室，用于监测植物生长室中的温度和湿度；温控组件，连通箱体内部，用于调节植物生长室中的温湿度；所述温控组件包括：冷却管，设于植物生长室，用于调节植物生长室温湿度；冷水发生器，设于箱体外侧，用于制冷控温水；气泵，设于箱体外侧，用橡胶软管连接冷却管和冷水发生器，用于将冷水发生器中的控温水泵入冷却管；所述13C气体反应发生装置中，所述13C-CO2反应杯放置在所述植物生长室左侧，所述13C-CO2反应杯的底部安装一根带胶塞废液排放管，通过NⅡ穿过箱体壁至箱体外；所述箱体的箱壁与所有导管穿过处均使用防水胶进行密封，以保证箱体严格密封。

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