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一种构树叶活性肽定向增量酶解方法 

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申请/专利权人:常熟理工学院

摘要:本发明公开了一种构树叶活性肽定向增量酶解方法,包括以下步骤:将构树叶粉与水混合制备构树叶粉溶液,并加热至60~90℃,然后加入NaOH,恒温加热10~20min;降温至30~45℃后,加入疏水性氨基酸特异性蛋白酶、内肽酶和氨肽酶,控制溶液pH值为8.0~9.0,恒温酶解4~5h;90~100℃灭酶10~20min后冷却;离心取上清液,进行分离、纯化、洗脱,得到构树叶活性肽。本发明在特定条件下,利用特定酶对构树叶进行水解,所得构树叶活性肽能够具有较高的抗氧化活性,较好地用于饲料添加,提高饲料质量。本发明在酶解前采用加热协同加碱方法进行蛋白质变性处理,缩短预处理时间,提高后续酶解反应的效率和提取率,蛋白质回收率达90%以上。

主权项:1.一种构树叶活性肽定向增量酶解方法,其特征在于,包括以下步骤:1将构树叶粉与水混合制备构树叶粉溶液;2将构树叶粉溶液加热至60~90℃后,加入NaOH,恒温加热10~20min,得到构树叶水液;3将构树叶水液降温至30~45℃后,加入疏水性氨基酸特异性蛋白酶、内肽酶和氨肽酶,控制溶液pH值为8.0~9.0,恒温酶解4~5h;4酶解反应后,90~100℃灭酶10~20min,然后进行冷却;5离心取上清液,并将上清液进行超滤膜过滤,收集分子量≤3000Da的滤液;6将采用TSKgelG2000SWXL色谱柱对滤液进行分离纯化,采用0.1%vv三氟乙酸乙腈溶液进行洗脱,得到构树叶活性肽。

全文数据:

权利要求:

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