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申请/专利权人：苏州系统医学研究所
摘要：本发明提供了一种快速制备多种MHC‑抗原肽四聚体的方法及其应用。该方法包括：构建获得pMHC单体蛋白，pMHC单体蛋白的编码序列依次包括编码抗原多肽、β2m、HLA重链、生物素连接酶识别基序和8×His标签序列的氨基酸序列的DNA序列；其中，抗原多肽和β2m通过连接子连接，连接子包括蛋白酶的氨基酸识别序列；将pMHC单体蛋白生物素化后，采用蛋白酶进行酶切反应；采用荧光染料标记的链霉亲和素进行交联获得四聚体；加入目的肽反应制备含有目的肽的MHC‑抗原肽四聚体。该方法操作简单、成本低，制备的四聚体性质稳定久，与特异性T细胞的结合效率高，满足进行新抗原肽及特异性TCR筛选等的研究需求，有望为肿瘤免疫治疗和T细胞反应的检测开发重要的工具。
主权项：1.一种快速制备多种MHC-抗原肽四聚体的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，构建获得pMHC单体蛋白，所述pMHC单体蛋白的编码序列依次包括编码抗原多肽、β2m、HLA重链、生物素连接酶识别基序和8×His标签序列的氨基酸序列的DNA序列；其中，抗原多肽为HLA重链对应亚型结合的抗原多肽，抗原多肽和β2m通过连接子连接，所述连接子包括蛋白酶的氨基酸识别序列；步骤二，将所述pMHC单体蛋白生物素化后，采用所述蛋白酶进行酶切反应；步骤三，采用荧光染料标记的链霉亲和素进行交联获得四聚体；步骤四，加入目的肽，在一定条件下反应制备含有目的肽的MHC-抗原肽四聚体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 苏州系统医学研究所 一种快速制备多种MHC-抗原肽四聚体的方法及其应用
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