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申请/专利权人:武汉奥科鼎盛生物科技有限公司
摘要:本发明提供一种鱼卵细胞裂解液及快速PCR扩增测序检测方法。包括:异硫氰酸胍、表面活性剂以及EDTA。本发明的有益效果在于:采用含有异硫氰酸胍、表面活性剂以及EDTA的细胞裂解液,可以一次性进行组织消化、细胞裂解,充分释放基因组,释放后的上清液可直接进行PCR反应,可实现PCR快速扩增,不需要在额外使用其余试剂以及后续进行DNA提取,增加了样品的安全性,减短了测试流程,提高了测试效率。
主权项:1.一种鱼卵快速PCR扩增测序检测方法,其特征在于,包括:步骤S1:将鱼卵样品加入细胞裂解液后破碎细胞壁,在加入细胞裂解液进行破碎细胞壁后采用离心对样品进行沉积固定;所述细胞裂解液组分如下:4.7molL的异硫氰酸胍,46molL的TrisHCl,体积百分比为1.2%的tritonx100;以及20mmolL的EDTA;步骤S2:加热静置待细胞充分裂解,得到粗品;所述加热静置待条件:80℃条件下静置30min;步骤S3:将所述粗品进行固液分离,收集其液体;所述固液分离条件:在10000rmin离心60s;步骤S4:加入扩增引物进行PCR扩增。
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