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一种基于PCR步骤多温度采集荧光信号的引物探针组合及其应用 

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申请/专利权人:广州市金圻睿生物科技有限责任公司

摘要:本发明涉及一种基于PCR步骤多温度采集荧光信号的引物探针组合及其应用。本发明设计特定的引物探针组合,利用引探信一体探针和Taqman探针在其对应的靶标扩增时,释放的荧光具有不同的温度特征,分别在PCR步骤中的较低检测温度一般为退火温度和较高检测温度一般为延伸温度或变性温度进行荧光采集,对采集的荧光信号值进行处理后,可绘制单一荧光通道的两条独立的扩增曲线,分别指示不同靶标的扩增情况,从而提高了单一荧光通道的检测通量,检测通量为传统Taqmn方法的2倍,且每个靶标的均有独立的扩增曲线,相较熔解曲线法,提高了准确性和便捷性。

主权项:1.一种基于PCR步骤多温度采集荧光信号的引物探针组合,其特征在于,所述引物探针组合包括第一引物探针组合和第二引物探针组合;所述第一引物探针组合包括目标核酸序列的扩增引物和引探信一体探针,所述引探信一体探针从5’端到3’端依次包括:探针引物区、靶标区、探针信标区;所述探针引物区与探针信标区反向的一部分反向互补;所述靶标区的序列与目标核酸序列反向互补,其3’端连接有第一荧光淬灭基团;所述探针信标区的5’端连接有荧光基团,3’端连接有第二荧光淬灭基团;所述第二引物探针组合包括目标核酸序列的扩增引物和Taqman探针。

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权利要求:

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