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申请/专利权人：山东大益生物科技集团有限公司;杭州龙明生物科技有限公司
摘要：本发明提供在烟草中细胞质定位表达和生产牛乳铁蛋白的方法，涉及生物基因工程技术领域，包括：（1）设计、合成牛乳铁蛋白多肽的基因编码序列，并与拟南芥质体定位蛋白PAC的信号肽编码序列构建重组基因；（2）将重组基因克隆到Ti质粒，通过该Ti质粒转化根癌农杆菌获重组根癌农杆菌；（3）用所述重组根癌农杆菌转化烟草组织或悬浮细胞，牛乳铁蛋白多肽在烟草细胞质中表达，获转基因植物或转基因细胞。在烟草中生产牛乳铁蛋白的方法，是回收通过烟草细胞质定位表达方法获得的转基因植物或转基因细胞表达的牛乳铁蛋白多肽。本发明实现牛乳铁蛋白在烟草中的表达并定位到细胞质体中累积，避免外源蛋白对宿主细胞的代谢影响，便于牛乳铁蛋白制备。
主权项：1.在烟草中细胞质定位表达牛乳铁蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）根据烟草基因表达密码偏好性设计、合成牛乳铁蛋白编码序列，在所述牛乳铁蛋白编码序列中添加6xHIS识别标签序列后，与拟南芥质体定位蛋白PAC的信号肽编码序列之间插入凝血酶Xa序列构建重组基因，所述信号肽编码序列为SEQIDNO:1，添加6xHIS识别标签序列的所述牛乳铁蛋白编码序列为SEQIDNO:2；（2）将步骤（1）的重组基因克隆到载体中制备重组载体，用所述重组载体转化根癌农杆菌，获重组根癌农杆菌；（3）用步骤（2）中所述重组根癌农杆菌转化烟草叶盘组织或悬浮细胞，牛乳铁蛋白多肽在细胞质中表达，获得转基因植株或转基因悬浮细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 山东大益生物科技集团有限公司 杭州龙明生物科技有限公司 在烟草中细胞质定位表达和生产牛乳铁蛋白的方法
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