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一种小鼠心脏来源细胞外微囊泡的制备方法及其应用 

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申请/专利权人:四川大学华西医院

摘要:本发明公开了一种小鼠心脏来源细胞外微囊泡的制备方法及其应用,涉及生物医学技术领域,其技术方案要点是:建立多种心脏相关的小鼠模型并获取其心脏组织为标本组织,将心脏转移到胶原酶缓冲液中,经心尖孔洞注射胶原酶缓冲液,观察到心脏处于完全消化的状态时,将心脏组织完全分离得到消化液,将消化液通过离心分离操作去除非细胞外微囊泡组分,获得细胞外微囊泡。本发明用以解决目前外泌体纯化分离过程中出现的样品处理量较小、处理时间较长、操作步骤繁琐以及获得的外泌体纯度不高的缺陷问题,能够避免在疾病诊断和治疗的实验过程中存在不利影响,便于为将来外泌体的临床运用提供理论基础。

主权项:1.一种小鼠心脏来源细胞外微囊泡的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、选用小鼠心脏心室组织为标本组织,建立多种心脏相关的小鼠模型;S2、将小鼠模型进行麻醉并暴露其心脏,截断与心脏相连的降主动脉和下腔静脉,经心脏的右心室基底注入乙二胺四乙酸溶液,清除右心室腔内血液;S3、取出心脏并夹闭升主动脉,将其转移至乙二胺四乙酸溶液中;S4、经心尖处注射乙二胺四乙酸溶液至左心室中,清除左心室腔内血液,同时形成一个心尖孔洞;S5、将心脏转移至灌注液中;S6、将灌注液通过心尖孔洞注入左心室中,清除室腔内的乙二胺四乙酸溶液;S7、将心脏转移到胶原酶缓冲液中,经心尖孔洞注射胶原酶缓冲液,清除室腔内的灌注液;S8、观察心脏的消化状态;S9、观察到心脏处于完全消化的状态时,打开升主动脉,将心脏转移至含有胶原酶缓冲液的培养皿中,同时将心脏组织完全分离得到消化液;S10、将消化液通过离心分离操作去除非细胞外微囊泡组分,获得细胞外微囊泡。

全文数据:

权利要求:

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