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申请/专利权人：厦门大学
摘要：本发明公开了敲除磷脂酶D基因的裂殖壶菌基因工程菌株及其构建方法和应用。本发明采用裂殖壶菌SchizochytriumlimacinumSR21为原始菌株，通过基因工程手段在大肠杆菌中构建敲除载体，以PLD基因的上下游序列作为同源臂，以博来霉素基因替换PLD基因并作为筛选抗性基因，得到一株高产DHA的基因工程菌株，为基因工程调控裂殖壶菌高产DHA提供了新的思路。
主权项：1.一种敲除磷脂酶D基因的裂殖壶菌基因工程菌株，其特征在于：所述基因工程菌株是选用SchizochytriumlimacinumSR21为原始菌株构建而成，所述基因工程菌株的基因组中磷脂酶D基因被敲除；所述的敲除磷脂酶D基因的裂殖壶菌基因工程菌株的构建方法，包括：1）以SchizochytriumlimacinumSR21基因组为模板，设计如SEQIDNo.3~SEQIDNo.6所示的引物；2）以步骤1）所述的引物克隆来源于SchizochytriumlimacinumSR21基因组的PLD基因的上下游序列作为同源臂，将得到的PLD基因上游同源臂和PLD基因下游同源臂插入到pBlue-zeo敲除载体的同源重组区域，构建PLD基因敲除载体pBlue-zeo-PLD；3）将构建好的PLD基因敲除载体pBlue-zeo-PLD的同源重组区域线性化，电转化至 Schizochytriumlimacinum SR21的基因组中进行同源重组，获得敲除PLD基因的裂殖壶菌基因工程菌株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 厦门大学 敲除磷脂酶D基因的裂殖壶菌基因工程菌株及其构建方法和应用
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