买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：金陵科技学院

摘要：本发明公开了一种茄子一倍单倍体花药培养方法，包括采集花蕾、花药培养前的花蕾预处理、花药预培养、胚状体诱导、胚状体萌发、壮苗和移栽炼苗等操作。与现有的二倍体茄子花药培养技术相比，本发明花蕾的取材范围宽，不需要对花粉细胞发育阶段进行鉴别；获得的再生植株无需鉴定细胞起源，只要是二倍体就可以直接自交建成DH系；延长供试花蕾的低温处理时间，整个过程中无需秋水仙素等化学药剂处理即可获得二倍体植株，提高了产生二倍体植株的频率，实现了茄子一倍单倍体植株的加倍，解决了单倍体植株加倍困难的问题。获得的7株再生植株，经过流式细胞法鉴定，其中2株为单倍体，其余5株为二倍体。

主权项：1.一种茄子一倍单倍体花药培养方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）采集茄子一倍单倍体植株上发育健壮、无病虫、花瓣包裹紧密的花蕾，将其密封保存，然后于4℃下低温处理4d至5d；（2）将步骤（1）中低温处理后的花蕾取出，剥去萼裂片，带入无菌室进行表面消毒，然后在无菌条件下剥出完整的花药，接种到预备培养基中封口后放入35℃培养箱中黑暗条件下培养1-3d，然后取出放到25℃培养箱中光暗交替条件下继续培养7-20d；所述的表面消毒采用二步法，先将整理好的花蕾浸泡于70%-75%的酒精，酒精深度没过花蕾，手摇或振荡1-5min，倒掉酒精；然后加入1-3滴吐温-80，再倒入6.5%的次氯酸钠溶液，手摇或振荡5-15min，然后倒掉次氯酸钠溶液，用无菌水冲洗3-5次，最后用灭菌的吸水纸或滤纸吸干花蕾表面的液体；（3）将步骤（2）预备培养基中的花药转入胚状体诱导培养基中，同样的光暗交替条件下培养10-30d，直至出现胚状体；（4）将步骤（3）胚状体及花药转入萌发培养基中，同样的条件下继续培养，每20d左右更换1次新鲜培养基；待胚状体发育出完整的根和芽后，再转入壮苗培养基中，直至叶片变厚，水渍化状态改善，株高达到2cm以上，及时炼苗移栽；（5）将步骤（4）的生根壮苗取出，不伤根的情况下洗掉根部所沾染的培养基，然后在多菌灵溶液中浸泡10-30min，取出后将根系点蘸IBA或NAA溶液，然后栽入未用过的育苗基质中，浇透而不积水，用薄膜覆盖苗盘，将苗盘放入以上光暗交替的培养箱中，7-15天逐步揭除薄膜，保持苗叶片不萎蔫，植株成活，叶片逐步增大；所述的多菌灵溶液由有效成分含量为50wt%的多菌灵可湿性粉剂与自来水按照1:500-800的质量比稀释得到，将根系基部浸入多菌灵溶液，浸泡时间为5-30min；所述的IBA或NAA溶液的浓度为200~1000ppm，苗根部在溶液中的点蘸时间为10s；所述的育苗基质为常见的蔬菜播种用的育苗基质，厚度不小于10cm，浇透但不积水；根系全部栽入基质，叶片全部露出基质，株行距为8cm左右；塑料薄膜密封后1周内不打开薄膜，1周后打开薄膜，拔除干枯死亡的苗，并浇水或喷水后，重新盖好薄膜；10天后薄膜向上提升，下部与苗盘顶部留出1cm的空隙，期间观察苗的状态，叶片出现萎蔫时，向叶面喷施自来水即可，15天后完全揭掉薄膜。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 金陵科技学院 一种茄子一倍单倍体花药培养方法