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申请/专利权人：上海烟草集团有限责任公司

摘要：本发明提供一种烟草羟基香叶基芳樟醇二萜烯醇糖苷的分析方法及二维液相色谱质谱联用系统。该方法包括如下步骤：对烟叶进行前处理，采用二维液相色谱质谱联用法对前处理所得待测样品进行定性定量分析：通过第一维液相色谱分离出目标组分，目标组分经补液稀释后进行捕集，再将捕集成分洗脱后由第二维液相色谱进行分离，通过质谱进行定性定量分析。该系统包括第一维液相色谱、补偿泵、连通接口、切换阀、捕集柱、第二维液相色谱、质谱和紫外检测器。本发明灵敏度高、准确性好，实现7种HGL‑DTGs半定量测定。

主权项：1.一种烟草羟基香叶基芳樟醇二萜烯醇糖苷的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：对烟叶进行前处理，采用二维液相色谱质谱联用法对前处理所得待测样品进行定性定量分析：通过第一维液相色谱分离出目标组分，目标组分经补液稀释后进行捕集，再将捕集成分洗脱后由第二维液相色谱进行分离，通过质谱进行定性定量分析；所述烟草羟基香叶基芳樟醇二萜烯醇糖苷包括LyciumosideI、NicotianosideI、NicotianosideIII、NicotianosideIV、NicotianosideV、NicotianosideVI和NicotianosideVII；所述前处理包括如下步骤：将所述烟叶在液氮下粉碎和磨粉；将步骤1）得到的烟叶在有机溶剂中进行振荡，离心后过膜，即得待测样品；所述第一维液相色谱的条件为：第一维液相色谱：反相液相色谱；第一维色谱柱：CAPCELLPAKMGIIIC18；流速：0.2mLmin；柱温：30℃；进样量：10.0μL；第一维流动相A相：水+0.1%甲酸；第一维流动相B相：甲醇+0.1%甲酸；梯度淋洗；所述梯度淋洗的具体程序为：0~5min，第一维流动相A相：第一维流动相B相体积比为70：30；5~20min，第一维流动相A相：第一维流动相B相体积比为70：30~5：95；20~25min，第一维流动相A相：第一维流动相B相体积比为5：95；25~26min，第一维流动相A相：第一维流动相B相体积比为5：95~70：30；26~50min，第一维流动相A相：第一维流动相B相体积比为70：30；所述第二维液相色谱的条件为：第二维液相色谱：反相液相色谱；第二维色谱柱：AgilentZORBAX300SBC18；流速：0.4mLmin；柱温：30℃；第二维流动相A相：水+0.1%甲酸；第二维流动相B相：乙腈+0.1%甲酸；梯度淋洗；所述梯度淋洗的具体程序为：0~22min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为95：5；22~27min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为95：5~70：30；27~37min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为70：30~40：60；37~37.1min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为40：60~5：95；37.1~45min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为5：95；45~45.1min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为5：95~95：5；45.1~50min，第二维流动相A相：第二维流动相B相体积比为95：5；所述质谱的条件为：电喷雾离子源，负离子扫描，多反应检测MRM模式；电喷雾电压：-4500V；离子源温度：500℃；离子对的驻留监测时间：20ms；雾化气压力：50Psi；辅助气压力：50Psi；质谱扫描时间：27~37min；所述捕集的条件为：捕集柱：ThermoscientificAcclaimPolarAdvantageII；补液：水；柱温：30℃；切割时间：16.8min~21.8min；补液流速0~15min，0.1mLmin；16~22min，1.0mLmin；23~30min，0.1mLmin。

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