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一种结直肠癌的外周血循环肿瘤细胞上皮联合间质标志物双重形态分型模型及其应用 

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申请/专利权人:复旦大学附属中山医院;上海普恩海汇医学检验所有限公司

摘要:本发明公开了一种结直肠癌的外周血循环肿瘤细胞上皮联合间质标志物双重形态分型模型及其应用。本发明通过机器学习构建的分类器,并采用k‑均值聚类算法。本发明利用循环肿瘤细胞的形态学特征对其进行分类,以确定循环肿瘤细胞的分类与结直肠癌病情的相关性。形态学特征包括细胞核大小和形态、细胞膜和或浆的大小、细胞膜和或浆的形态,以及循环肿瘤细胞标志物在细胞膜和或浆的分布中的一种或多种。本发明通过免疫荧光染色获得的CTC形态学特征被输入分类器,用于预测循环肿瘤细胞所属对象的结直肠癌病情。本发明分类模型为结直肠癌的诊断、分期、预后评估和治疗监测提供有力支持,可用于临床决策指导。

主权项:1.一种用于结直肠癌患者循环肿瘤细胞检测及分型的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:获得待测受试者的富集含有CTC的细胞样本;步骤2:对富集的细胞样本进行免疫荧光染色,标记上皮细胞粘附分子、细胞角蛋白和CD45蛋白,以得到荧光标记的细胞样本;步骤3:使用高内涵荧光扫描仪,对标记的细胞样本进行扫描;细胞核信号位于DAPI通道,上皮型标志物EpCAMCK信号位于TRITC通道,间质型标志物DDR2SnailSlug信号位于FITC通道,白细胞标志物CD45信号位于Cy5通道;扫描后,根据免疫染色特征鉴定CTC细胞;各通道阳性判定标注为,信号明确强于背景且具有细胞形态;若细胞具备DAPI通道阳性Cy5通道阴性且TRITC和FITC通道至少有一个为阳性时,则将其归类为CTC;步骤4:对CTC阳性图像进行预处理、细胞识别、形态学特征提取和测量;步骤5:获得的CTC形态学特征输入预先构建的循环肿瘤细胞类型分类器中进行分型。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 复旦大学附属中山医院 上海普恩海汇医学检验所有限公司 一种结直肠癌的外周血循环肿瘤细胞上皮联合间质标志物双重形态分型模型及其应用

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