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一种基于RPA和Cas12a的棉蚜吡虫啉抗性快速可视化检测试剂盒及应用 

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申请/专利权人:中国农业大学

摘要:本发明提供一种基于RPA和Cas12a的棉蚜吡虫啉抗性快速可视化检测试剂盒及应用。该试剂盒包括针对棉蚜nAChRβ1亚基V62IR81T抗性突变位点的特异RPA引物对和crRNA。通过将RPA与CRISPR技术结合,并筛选优化检测抗性突变位点用的CRISPRCas12a检测体系中各反应试剂的浓度,能有效区分只有单碱基差异的棉蚜吡虫啉敏感个体与靶标抗性个体。本发明还提供基于RPA‑CRISPRCas12a平台的棉蚜吡虫啉抗性的快速便捷的可视化检测系统,利用该系统在70min之内将棉蚜种群对吡虫啉抗性进行快速、便捷、灵敏且特异的可视化核酸检测,为棉蚜吡虫啉抗药性田间现场检测提供有效手段。

主权项:1.棉蚜吡虫啉抗性多重检测的crRNA组合,其特征在于,包含用于检测棉蚜吡虫啉nAChR靶标抗性突变位点V62I的crRNA,其序列如SEQIDNO:5所示;以及,用于检测棉蚜吡虫啉nAChR靶标抗性突变位点R81T的crRNA,其序列如SEQIDNO:6所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业大学 一种基于RPA和Cas12a的棉蚜吡虫啉抗性快速可视化检测试剂盒及应用

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