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申请/专利权人:湖南农业大学
摘要:本发明公开了一种与植物低渗感受器密切相关基因的鉴定方法,包括候选基因克隆,候选基因的表达系统的建立,生长速率的检测、记录、分析,鉴定出与植物低渗感受器密切相关的基因。本发明还公开了一种与植物低渗感受器密切相关基因在提高植物抗旱性中的应用。本发明首次实现了植物低渗感受器的鉴定,且该鉴定方法具有快速高效的特点;通过该方法可以用来鉴定植物界所有真核生物OSCA基因家族的低渗感受器,同时也可以用来鉴定其它具有离子通道活性的其它低渗感受器。本发明提供的与植物低渗感受器密切相关基因在提高植物抗旱性中的应用,为植物的抗干旱胁迫逆境栽培及抗逆品种选育提供理论与实践依据。
主权项:1.一种与植物低渗感受器密切相关基因的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:1候选基因克隆:将植物低渗感受器候选基因克隆到Gateway入门质粒pENTRTM中,然后克隆到目的质粒pDEST14中,进行基于T7启动子的表达;将去除致死基因的空载体pENTRTM作为对照;2候选基因的表达系统的建立:将带有候选基因的pDEST14质粒转移到BL21DE3pLysS菌株中,该菌株为有毒蛋白的表达提供严格控制,并将新转化的菌株铺在氨苄青霉素和氯霉素平板上,并在37℃下孵育过夜;3生长速率的检测:将培养物离心,并使用LSHypo-LB培养基重悬沉淀,稀释,将稀释液以1.5μL点的体积点样到1-5#培养基平板上;4生长速率结果分析:对生长速率结果进行记录并分析,鉴定出与植物低渗感受器密切相关的基因。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 湖南农业大学 与植物低渗感受器密切相关基因的鉴定方法及其在提高植物抗旱性中的应用
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