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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本发明公开了一种番茄植株中基因瞬时表达的方法及装置，属于植物分子生物技术领域。所述方法包括：1配制农杆菌侵染液，所述农杆菌携带目标基因；2选择在三叶一心到六叶一心期的番茄幼苗，将番茄植株倒置使得叶片完全浸没于农杆菌侵染液中，真空条件处理；3将番茄植株从农杆菌侵染液中取出，再培养获得目标基因导入的番茄转化株，目标基因在植株体内瞬时表达。采用本发明建立的基因瞬时表达方法及配套装置，对植株无损伤，方法简单易操作且表达效果好，在一定程度上解决了番茄遗传转化体系周期长表达不稳定的问题，最大程度节省了转化周期和成本，可用于番茄分子生物学研究中批量进行基因功能鉴定和快速筛选功能。
主权项：1.一种番茄植株中基因瞬时表达的方法，其特征在于，包括以下步骤：1配制农杆菌侵染液，侵染液中重组农杆菌的浓度为OD600=0.5~1.0，所述农杆菌携带含有目标基因的重组质粒；2选择在四叶一心期的番茄幼苗，将番茄植株倒置使得叶片完全浸没于农杆菌侵染液中，在-0.1MPa的真空条件下处理1~5min，然后恢复至常压条件，保持1~2min；农杆菌侵染液的配制方法包括：首先配制渗透液，渗透液的组成包括：10mM吗啉乙磺酸，10mMMgCl2，150mM乙酰丁香酮，pH5.6；再往渗透液中加入终浓度为0.03%~0.05%的表面活性剂，混匀后加入含有目标基因重组质粒的农杆菌，重悬制得农杆菌侵染液，所述表面活性剂为三硅氧烷聚乙氧基化物、聚山梨醇酯20或辛基苯酚乙氧基化物；3将番茄植株从农杆菌侵染液中取出，先置于光照强度为30~50μmol·m-2·s-1的环境下恢复1~2h后，再置于光照强度为200~250μmol·m-2·s-1的生长环境中培养，所述培养为光周期为昼12h夜12h，温度为昼25℃夜21℃，相对湿度60%的生长环境中培养2~3天，获得目标基因导入的番茄转化株，目标基因在植株体内瞬时表达。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学 一种番茄植株中基因瞬时表达的方法及装置
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