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一种肝脏组织解离试剂盒及其解离方法 

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申请/专利权人:广州元信生物科技有限公司

摘要:本发明提供了一种人肝脏单细胞悬液制备试剂盒及其解离方法,具体成分包括EnzymeA、EnzymeB、BufferC、BufferD、BufferE、CaCl2溶液以及红细胞裂解液。采用本发明公开的试剂盒获得的肝脏单细胞足够分散、产量高、背景干净、形态好,可获得较高占比的肝实质细胞,经AOPI染色后检测活性高,适用于单细胞转录组精准测序,利于后续的单细胞测序以获得肝脏细胞中基因表达水平的变化信息,更适用于临床手术肝脏组织的单细胞解离。

主权项:1.一种人肝脏单细胞悬液制备试剂盒,其特征在于,其包括:EnzymeA、EnzymeB、BufferC、BufferD、BufferE、0.5%(wv)CaCl2溶液以及红细胞裂解液;其中EnzymeA为含0.1%(wv)EDTA的Accutase酶;EnzymeB为枯草杆菌蛋白酶A、胶原蛋白酶A以及BSA按质量比1:3:1组成的冻干粉;BufferC为含20mM葡聚糖硫酸钠盐的HBSS液;BufferD为含10%(wv)FBS的DPBS溶液;BufferE为去碎片试剂;所述HBSS溶液不含Ca2+、Mg2+;所述BufferE的配制方法为,将Percoll原液与8.5%(wv)NaCl溶液按体积比9:1混合成100%的Percoll溶液,然后用1×PBS稀释成25%的Percoll溶液。

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权利要求:

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