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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9的产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器构建方法及应用，属于基因工程领域。本发明提供的产琥珀酸放线杆菌碱基编辑器可用于产琥珀酸放线杆菌DNA水平特定位点的特异性突变。本发明构建的胞嘧啶碱基编辑器CBE和腺嘌呤碱基编辑器ABE，分别成功介导C·G‑‑T·A和A·T‑‑G·C。碱基编辑器CBE是由rAPOBEC1、nCas9D10A和UGI融合蛋白1表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒；碱基编辑器ABE是由TadA8e和nCas9D10A融合蛋白2表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒；且碱基编辑器上都含有温度敏感复制启动蛋白pSG5Rep。本发明开发的适用于产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器，操作简单，转化效率高，具有一定的应用价值。
主权项：1.一种产琥珀酸放线杆菌碱基编辑器，其特征在于，所述产琥珀酸放线杆菌碱基编辑器包括胞嘧啶碱基编辑器CBE或腺嘌呤碱基编辑器ABE；所述胞嘧啶碱基编辑器CBE包括融合蛋白1和sgRNA表达元件；所述融合蛋白1包括rAPOBEC1、nCas9D10A和UGI；所述nCas9D10A的N端融合rAPOBEC1，所述nCas9D10A的C端融合UGI；所述腺嘌呤碱基编辑器ABE包括融合蛋白2和sgRNA表达元件；所述融合蛋白2包括TadA8e和nCas9D10A；所述nCas9D10A的N端融合TadA8e。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种基于CRISPR-Cas9的产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器构建方法及应用
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