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一种冰冻损伤诱导的口颌肌纤维化模型的建立方法 

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申请/专利权人:四川大学

摘要:本申请涉及动物模型技术领域,尤其涉及一种冰冻损伤诱导的口颌肌纤维化模型的建立方法;所述建立方法包括:麻醉动物模型,并进行脱毛和消毒,后分别在动物模型的咬肌和胫骨前肌的浅面皮肤处制备预设尺寸的切口,并进行术区暴露,得到咬肌暴露损伤区域和胫骨前肌暴露损伤区域;分别采用干冰对咬肌暴露损伤区域和胫骨前肌暴露损伤区域进行冰冻至暴露损伤区域内肌肉发白为止,后等待肌肉回复至初始状态,得到咬肌创伤区域和胫骨前肌创伤区域;分别对咬肌创伤区域和胫骨前肌创伤区域进行取样并制备冰冻切片,后将两种冰冻切片进行组织形态的对比,得到口颌肌纤维化模型;该方法可以在成本较低的前提下准确模拟口颌肌创伤修复纤维化的模型。

主权项:1.一种冰冻损伤诱导的口颌肌纤维化模型的建立方法,其特征在于,所述建立方法包括:麻醉动物模型,并进行脱毛和消毒,后分别在所述动物模型的咬肌和胫骨前肌的浅面皮肤处制备预设尺寸的切口,并进行术区暴露,得到咬肌暴露损伤区域和胫骨前肌暴露损伤区域;分别采用干冰对所述咬肌暴露损伤区域和所述胫骨前肌暴露损伤区域进行冰冻至暴露损伤区域内肌肉发白为止,后等待所述肌肉回复至初始状态,得到咬肌创伤区域和胫骨前肌创伤区域;分别对所述咬肌创伤区域和所述胫骨前肌创伤区域进行取样并制备冰冻切片,后将两种冰冻切片进行组织形态的对比,筛选出差异特征的数据,根据该数据通过3D建模软件构建数字化的口颌肌纤维化模型;所述预设尺寸包括5mm±1mm,所述等待的时间为20s~25s,所述取样的时刻为所述咬肌创伤区域或所述胫骨前肌创伤区域形成的14d后,所述制备冰冻切片包括:首先进行组织包埋,然后进行组织固定,组织包埋包括:将冰冻介质异戊烷放入液氮中冷却至少10min,确保异戊烷的温度低于-120℃,肌肉长轴垂直于模具底面插入含有OCT包埋剂的圆柱状模具中,然后将圆柱状模具转移到异戊烷中迅速冷却30s~50s直至其变为白色固体,组织固定的温度≤-20℃,所述制备冰冻切片还包括口颌肌收集阶段,所述口颌肌收集阶段包括采用相邻阶段间隔500µm的方式收集口颌肌组织样品。

全文数据:

权利要求:

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