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检测西番莲木质化病毒的引物组、试剂盒及方法 

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申请/专利权人:中国热带农业科学院三亚研究院;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

摘要:本公开属于病毒检测技术领域,提供了检测西番莲木质化病毒的引物组、试剂盒及方法。引物组包括:PWV‑F、PWV‑R、PWV‑P1或PWV‑P2。试剂盒包括反应液,反应液包括上述引物组和检测内参基因PeERS2的引物组。检测方法:提取西番莲植物总RNA,对其进行逆转录合成cDNA第一链;以cDNA第一链为模板,利用上述试剂盒中的两个引物组进行荧光定量PCR,通过扩增曲线和标准曲线来判断是否有西番莲木质化病毒存在。本公开采用基于双重荧光探针检测的多重实时荧光定量PCR,同时对靶标基因和内参基因进行检测,大大提升了检测通量,保证了结果的可靠性和可重复性。

主权项:1.一种检测西番莲木质化病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括反应液,所述反应液包括:检测西番莲木质化病毒的引物组:上游引物PWV-F,其核酸序列如SEQIDNO:1:GCATACCGTGCCAAGCTTCT所示;下游引物PWV-R,其核酸序列如SEQIDNO:2:AGAAACATGGAGGGACTGTACATG所示;TaqMan荧光探针PWV-P1,其核酸序列如下所示:VIC-SEQIDNO:3-BHQ1;其中,SEQIDNO:3的核酸序列为:CTCTCAAATTGCGGAGAAGGCCGTACC;和,检测内参基因PeERS2的引物组:上游引物PeERS2-F1,其核酸序列如SEQIDNO:5:TTGGAGGAATGTGCAATATGGAT所示;下游引物PeERS2-R3,其核酸序列如SEQIDNO:11:TTGTGCTTGATAATTTAGGGTGTGA所示;TaqMan荧光探针PeERS2-P3,其核酸序列如下所示:FAM-SEQIDNO:12-BHQ1;其中,SEQIDNO:12的核酸序列为:CCCGTACTGGTTCCACTCTGCAGCTTT。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国热带农业科学院三亚研究院 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 检测西番莲木质化病毒的引物组、试剂盒及方法

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