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包括冷冻和解冻过程的获得百日咳杆菌来源的蛋白质的方法 

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申请/专利权人:株式会社绿十字

摘要:本发明涉及一种获得百日咳杆菌来源的PRN蛋白的方法,该方法包括能够有效提高PRN蛋白的提取水平的冷冻和解冻过程。在本发明中,发现当在用尿素处理之前将粒料冷冻,然后在低温下缓慢融化时,与在其他条件下的实验组相比,PRN蛋白的提取水平有效地增加。另外,即使当该方法应用于大规模生产时,也有效地提高了PRN提取水平。因此,包括冷冻和解冻过程的百日咳杆菌的预处理方法,可以有效地用于批量生产为百日咳疫苗所用的PRN。

主权项:1.一种获得百日咳杆菌来源的PRN蛋白的方法,包括以下步骤:1冷冻含有百日咳杆菌的样品;2解冻所述冷冻样品;3破碎所述解冻样品;以及4纯化所述被破碎的样品,其中,所述含有百日咳杆菌的样品是通过离心百日咳杆菌培养物以获得浆料,然后,将所述浆料立即离心或存储3天后离心以获得的粒料,其中,在步骤1)中,所述冷冻在-30°C至-90°C的温度下进行20小时至40小时,其中,步骤2)中,所述解冻在1℃至20℃的温度下冷藏12小时至60小时进行,其中,在步骤3)中,所述破坏通过尿素处理进行,及其中,在步骤4)中,所述纯化通过离子交换色谱法(IEX),疏水相互作用色谱法(HIC)和凝胶过滤色谱法(GFC)进行。

全文数据:

权利要求:

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