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申请/专利权人:西湖大学
摘要:本发明公开了一种诱导型神经前体细胞及其生产方法和应用。本申请中所产生的iNPCs以iPSCs为种子细胞,首先避免了胚胎干细胞为种子细胞所产生的伦理问题,免疫排异及批量化生产的瓶颈。GMP级iNPCs的制备方案和质控手段同时增加了治疗细胞的产量,以使其能够用以基因编辑以达到精准治疗的效果。
主权项:1.一种诱导型神经前体细胞生产方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)获得诱导多功能干细胞;(2)将步骤(1)所得诱导多功能干细胞分散成单细胞悬浮液,接种到培养容器中,使用诱导培养基进行诱导培养获得3D细胞球即为所述诱导型神经前体细胞,其中,步骤(2)中诱导培养分为三个阶段:第一阶段:使用第一诱导培养基培养至第5天,所述第一诱导培养基为:基础培养基为DMEMF12培养基,添加剂包括浓度为1×的N2细胞培养添加剂,1×的PS,10μM的SB431542,200nM的LDN193189,10μM的Y27632;第二阶段:使用第二诱导培养基培养至第7天,所述第二诱导培养基为:基础培养基为DMEM培养基,添加剂包括浓度为1×的N2细胞培养添加剂,1×的B27,1×的GlutMAX,1×的PS,10μM的SB431542,200nM的LDN193189;第三阶段:使用第三诱导培养基培养至第10天,所述第三诱导培养基为:基础培养基为DMEM培养基,添加剂包括浓度为1×的N2细胞培养添加剂,1×的B27,1×的GlutMAX,1×的PS,10ngml的EGF,10ngml的FGF2。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 西湖大学 一种诱导型神经前体细胞及其生产方法和应用
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