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显著提高鳜受精卵显微操作后成活率的方法 

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申请/专利权人:中国科学院水生生物研究所;武汉市农业科学院

摘要:本发明提供了一种显著提高鳜受精卵显微操作后成活率的方法,其主要技术包括:鳜人工授精、显微注射、受精卵孵化、孵化期间培养液的维持。本发明采用改进的人工授精方法和受精卵培养液配方,显著提高了显微注射后受精卵的孵化率和成活率,为鳜基因组编辑育种提供技术支撑。

主权项:1.一种显著提高鳜受精卵显微操作后成活率的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、鳜亲本经注射催产激素到达效应时间后,轻挤雌鱼和雄鱼腹部,收取卵和精子,吸取卵和精子于容器中混合均匀,加入海盐溶液,将精卵混合物搅拌悬浮,静置,加入曝气水,静置,将多余的水倒出,加入曝气水淹没受精卵,容器充气,静置备用;步骤2、将NaCl、KCl、CaCl2和HEPES溶于水中,配置培养液母液;步骤3、用琼脂糖和1X浓度培养液制作受精卵夹持槽;步骤4、吸取受精卵至受精卵夹持槽中,将受精卵排列整齐,加入1X浓度培养液,使用显微注射仪将基因敲除体系注射进受精卵动物极;步骤5、准备容器,注入1X浓度培养液,将注射后的受精卵放入孵化器中,将孵化器固定在容器液面以下,通气,流水孵化;步骤6、将孵化器在不同浓度培养液连续培养,培养完成后,将培养液在五个小时内陆续稀释,最后进入淡水。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国科学院水生生物研究所 武汉市农业科学院 显著提高鳜受精卵显微操作后成活率的方法

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