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一种NK细胞的体外培养方法及其应用 

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申请/专利权人:河北可奇生物科技有限公司

摘要:本发明属于细胞培养技术领域,公开了一种NK细胞的体外培养方法及其应用。本发明提供的NK细胞的体外培养方法包括如下步骤:用NK细胞活化培养基重悬获取的血样的单个核细胞,孵育培养;培养至第3~5天,补加NK细胞扩增培养基;培养至第5~7天,补液,扩培;之后每2~3天,补液,培养至第14~21天,得所述NK细胞;其中,所述NK细胞活化培养基中包括IL‑2、IL‑15、IL‑18和氢化可的松在内的细胞因子。本发明提供的NK细胞的体外培养方法具有操作简便、生产成本低、安全性高、普适性的优点;通过本方法制得的NK细胞中NK淋巴细胞的纯度在85%以上,对K562和Raji肿瘤细胞系均具有显著杀伤作用。

主权项:1.一种NK细胞的体外培养方法,其特征在于:所述体外培养方法包括如下步骤:步骤一、第0天,分离获取血样的单个核细胞,用NK细胞活化培养基重悬所述单个核细胞,进行孵育培养;步骤二、培养至第3~5天,补加NK细胞扩增培养基;步骤三、培养至第5~7天,补加所述NK细胞扩增培养基,扩大培养;步骤四、之后每2~3天,补加所述NK细胞扩增培养基,培养至第14~21天,得所述NK细胞;其中,所述血样为外周血或脐带血;所述NK细胞活化培养基包括KBM581培养基、细胞因子组合物和血液制品;所述细胞因子组合物包括IL-2、IL-15、IL-18和氢化可的松。

全文数据:

权利要求:

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