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申请/专利权人:南京农业大学
摘要:本发明公开了多拷贝贻贝蛋白重组表达菌株的构建与高密度发酵方法,属于基因工程与生物工程的技术领域。本发明构建串联两拷贝的质粒,以大肠杆菌为宿主,成功实现高效可溶性表达,将贻贝蛋白Mfp3的表达量提高了1.7倍。通过发酵工艺优化,在5L发酵罐中进行分批补料的高密度发酵,实现了多拷贝贻贝蛋白的高效合成,产量达220mgL,为工业化生产贻贝蛋白奠定了基础。
主权项:1.多拷贝贻贝蛋白高效表达体系的构建方法,其特征在于包括以下步骤:1多拷贝贻贝蛋白表达载体的构建构建含有双拷贝贻贝蛋白Mfp3基因的重组表达载体pET29a-2×mfp3,所述的贻贝蛋白Mfp3基因为经密码子优化的,序列如SEQIDNO.1所示;2多拷贝贻贝蛋白表达菌株的制备将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞,筛选多拷贝贻贝蛋白表达菌株EC-2×Mfp3,对其进行诱导表达,从而获得可溶性的贻贝蛋白。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南京农业大学 多拷贝串联与高密度发酵合成贻贝蛋白的方法
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