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申请/专利权人:江西省科学院生物资源研究所
摘要:本发明提供了一种基于谱效关系的米糠脂肪烷醇质量检测方法,属于中医药、食品、饲料质量控制技术领域。本发明以不同组成的米糠脂肪烷醇的指纹图谱为基础,以抗应激活性为主要研究内容,通过对不同组成的米糠脂肪烷醇进行含量的检测,配合抗应激活性,联合灰度关联分析法GRA和SIMCA14.1的偏最小二乘回归分析法PLSR,构建谱效关系模型,筛选出米糠脂肪烷醇抗应激活性成分的色谱峰中与活性相关的共有峰。本发明所述的评价方法准确、灵敏度高,为米糠脂肪烷醇抗应激物质基础和质量评价提供依据,也为米糠脂肪烷醇进一步的产品开发提供参考。
主权项:1.一种基于谱效关系的米糠脂肪烷醇抗应激功效的质量评价方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1米糠脂肪烷醇的制备取8-12kg精制米糠蜡,加入2-4倍体积无水乙醇、6-8倍体积200号溶剂油,以及0.1-0.15倍质量的氢氧化钠,水浴加热至沸,搅拌回流反应3-5h后,用热水洗涤,以除去下层水相,洗至pH值等于6.5-7.5,将上层清液冷却过夜,真空抽滤,得滤饼,将滤饼脱溶、烘干,即得米糠蜡皂化粗醇;对制备的粗醇进行精馏,分段收集塔顶温度为160-200℃的馏分即得8种不同组成的米糠脂肪烷醇;2米糠脂肪烷醇供试品微乳液的制备分别将步骤1中制得的8种不同组成的100mg米糠脂肪烷醇与250mg吐温80混合,加热至85-95℃,然后边搅拌边缓慢滴加入100mL沸水中,形成浓度为1.0mgmL的微乳液;3米糠脂肪烷醇及高级脂肪烷醇标准品溶液的制备分别精确称取二十二烷醇C22、二十四烷醇C24、二十六烷醇C26、二十八烷醇C28、三十烷醇C30标准品,以及8种指纹图谱的米糠脂肪烷醇各5mg,溶于正己烷中,用10mL容量瓶定容,制得500μgmL的溶液;48种不同组成的米糠脂肪烷醇GC指纹图谱的建立GC色谱分析条件为:检测器:FID;色谱柱:DB-5HT,规格为30m×320μm×0.1μm;柱温:260℃,保持lmin,以5℃min的速度升至300℃,保持11min;气化室温度:300℃;检测器温度:300℃;载气N2流速:25.0mLmin;氢气流速:30.0mLmin;助燃气Air流速:400mLmin;进样量:1μL;分流比:30:1;5通过体外细胞实验评价不同组成的米糠脂肪烷醇的抗应激活性;6应用灰色关联分析法和PLSR建立米糠脂肪烷醇指纹图谱中的共有峰与抗应激活性的谱效关系;7根据米糠脂肪烷醇的不同共有峰与抗应激活性的谱效关系建立质量标准检测米糠脂肪烷醇的质量。
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