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用于可视化检测VanA型耐万古霉素屎肠球菌的引物探针组合及其应用 

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申请/专利权人:连云港市第二人民医院(连云港市临床肿瘤研究所)

摘要:本发明公开了用于可视化检测VanA型耐万古霉素屎肠球菌的引物探针组合及其应用。本发明首先以耐万古霉素屎肠球菌的VanA基因为目标靶点设计了5组候选引物对,通过基础型RPA反应和琼脂糖凝胶电泳,根据引物对的扩增性能及引物二聚体的形成情况筛选最适引物对。根据筛选出的最适引物对设计特异性的探针,通过对引物和探针的碱基错配消除假阳性信号。对该检测体系进行了严格的功效测试,确定了最佳反应时间和温度,从而建立了一种改进的RPA‑LFS系统。该方法与PCR和琼脂稀释法检测结果一致。本方法具有较高的灵敏度和特异性,只需一台水浴锅就可完成检测,可为及时制定合理的治疗方案提供关键证据。

主权项:1.用于可视化检测VanA型耐万古霉素屎肠球菌的引物探针组合,其特征在于:包括VanA-FRP引物探针组合;所述VanA-FRP引物探针组合中:VanA-F的序列为:GTCGGTTGTGCGGTATTGGGAAACAGTGCC;VanA-R的序列为:Biotin-CTCGCTCGTCTGCTGAAAGGTCTGCGGGAA;VanA-P的序列为:FITC-GTCGGTTGTGCGGTATTGGGAAACAGTGCC[H]CGTTAGCTGTTGGCG-C3-spacer。

全文数据:

权利要求:

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