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一种抗虫基因和耐草甘膦基因表达载体及其应用 

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申请/专利权人:杭州芳韵生物科技有限公司

摘要:本发明公开了一种抗虫基因和耐草甘膦基因表达载体及其应用,所述表达载体含有抗虫基因cry1Ab、抗虫基因cry2Ae和耐草甘膦基因cp4。本发明在cry2Ae基因前面加了叶绿体信号肽序列,一方面增加了Cry2Ae蛋白的表达量,增加幅度为20%‑100%;另一方面,降低了高表达量的Cry2Ae蛋白对植物生长发育造成的干扰。同时,本发明载体同时表达Cry1Ab、Cry2Ae和Cp4蛋白,用该载体转化农作物获得的转基因作物能够同时抗草地贪夜蛾、棉铃虫、甜菜夜蛾、玉米螟、二化螟等农作物的主要鳞翅目害虫,扩宽了转基因作物的抗虫范围,而且能有效延缓害虫抗性的产生,同时使转基因作物具有抗草甘膦的能力。

主权项:1.一种抗虫基因和耐草甘膦基因的表达载体,其特征在于所述表达载体含有抗虫基因cry1Ab、抗虫基因cry2Ae、烟草MAR序列和耐草甘膦基因cp4;启动抗虫基因cry1Ab表达的玉米泛素启动子pZmUbi,终止该基因表达的根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因的终止子Tnos;启动抗虫基因cry2Ae表达的玉米泛素启动子pZmUbi,玉米EPSPS基因的叶绿体信号肽,终止该基因表达的根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因的终止子Tnos;启动耐草甘膦基因cp4表达的CaMV35S启动子p35S与玉米actin2的第二个内含子组成的复合启动子p35S-intron,水稻EPSPS基因的叶绿体信号肽,终止该基因表达的CaMV35S终止子T35S;所述抗虫基因cry1Ab核苷酸序列为SEQIDNo:1所示;所述抗虫基因cry2Ae核苷酸序列为SEQIDNo:3所示;所述耐草甘膦基因cp4核苷酸序列为SEQIDNo:5所示;所述玉米泛素启动子pZmUbi核苷酸序列如SEQIDNo:11所示;所述复合启动子核苷酸序列如SEQIDNo:7所示;所述玉米EPSPS基因的叶绿体信号肽核苷酸序列如SEQIDNo:10所示;所述水稻EPSPS基因的叶绿体信号肽核苷酸序列如SEQIDNo:8所示;所述烟草MAR序列核苷酸序列为SEQIDNo:13所示。

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