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一种艾叶腺毛和非腺毛观察、计数的荧光显微制片技术 

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申请/专利权人:河南中医药大学

摘要:本发明提供了一种艾叶腺毛和非腺毛观察、计数的荧光显微制片技术,涉及植物显微鉴定技术领域。本发明通过荧光染色,利用腺毛和非腺毛自发荧光的差异,可以清晰观察到腺毛和非腺毛的分布情况,并分别完成腺毛和非腺毛的观察计数。本发明所述计数方法技术取样量少,节约试剂,成本低,极易操作,成功率高,很容易达到令人满意的实验目的,解决了长期困扰研究者的这一重大科学问题。

主权项:1.一种艾叶腺毛和非腺毛的计数方法,其特征在于,包括以下步骤:1将艾叶在盐酸溶液中浸泡后清洗和晾干,切取部分叶片并在水封片后,在落射荧光显微镜下对荧光显色的腺毛进行计数;所述浸泡前还包括对新鲜的成熟艾叶进行表面清洗,所述浸泡用的盐酸溶液浓度为25~35%,所述浸泡的时间为2~8min;利用所述落射荧光显微镜的绿光或蓝光激发荧光;2将所述部分叶片置于丙二醇中浸泡12~24h,利用小檗碱的水溶液或吖啶黄088的水溶液染色5~10min,再转移至甲苯胺蓝O的PBS溶液中染色1~5min,清洗和水封片,在落射荧光显微镜下对荧光显色的非腺毛柄部进行计数;所述小檗碱的水溶液或吖啶黄088的水溶液进行染色时,所述小檗碱的水溶液或吖啶黄088的水溶液的质量浓度均为0.1%~0.5%,所述染色的温度为60~70℃,染色的时间为5~15min;甲苯胺蓝O的PBS溶液中,甲苯胺蓝O溶液的质量浓度为0.2%~0.5%;利用所述落射荧光显微镜的蓝光激发荧光。

全文数据:

权利要求:

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