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申请/专利权人:南京灿辰微生物科技有限公司
摘要:本发明属于微生物学和遗传学技术领域,尤其涉及一种检测细菌菌株耐药酶基因的引物组及分型检测方法及试剂盒,所述引物组为耐β‑内酰胺酶基因和耐碳青霉烯酶基因的扩增引物,所述耐β‑内酰胺酶基因包括SHV、TEM、CTX‑M,所述耐碳青霉烯酶基因包括NDM、OXA‑23、KPC。根据特定的酶分型引物进行PCR扩增,采用磁珠法提取基因组DNA,以提高DNA提取的效率和纯度,从而优化PCR的准确性和效率,通过琼脂糖凝胶电泳和后续测序分析,与NCBI数据库对比确认具体酶分型结果。简化了实验流程,降低了成本,并为新型β‑内酰胺酶和碳青霉烯酶抑制剂的筛选及临床用药提供科学依据,具有高效、准确和成本效益高的优点。
主权项:1.一种检测细菌菌株耐药酶基因的引物组,其特征在于,所述引物组为耐β-内酰胺酶基因和耐碳青霉烯酶基因的扩增引物,所述耐β-内酰胺酶基因包括SHV、TEM和CTX-M,所述耐碳青霉烯酶基因包括NDM、OXA-23和KPC;扩增所述耐β-内酰胺酶基因中SHV的引物包括SHV-F和SHV-R,所述SHV-F的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述SHV-R的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;扩增所述耐β-内酰胺酶基因中TEM的引物包括TEM-F和TEM-R,所述TEM-F的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,所述TEM-R的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;扩增所述耐β-内酰胺酶基因中CTX-M的引物包括CTX-M-F和CTX-M-R,所述CTX-M-F的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,所述CTX-M-R的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示;扩增所述耐碳青霉烯酶基因中NDM的引物包括NDM-F和NDM-R,所述NDM-F的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示,所述NDM-R的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示;扩增所述耐碳青霉烯酶基因中OXA-23的引物包括OXA-23-F和OXA-23-R,所述OXA-23-F的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示,所述OXA-23-R的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示;扩增所述耐碳青霉烯酶基因中KPC的引物包括KPC-F和KPC-R,所述KPC-F的核苷酸序列如SEQIDNO.11所示,所述KPC-R的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示。
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