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一种基于RPA-CRISPR/Cas13a体系的快速检测肉毒杆菌的试剂盒及应用 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明公开了一种基于RPA‑CRISPRCas13a检测肉毒杆菌的方法及试剂盒。该检测包括基于RPA‑CRISPRCas13a检测肉毒杆菌的引物探针组合:RPA扩增的引物对、crRNA和RNA探针;所述RPA扩增的引物对包括正向引物RP‑RD‑F和反向引物RP‑RD‑R。本发明建立的检测系统及试剂盒无需在标准专业实验室操作昂贵试验设备,推动了肉毒杆菌检测技术的发展,为防控肉毒杆菌感染提供技术支持。

主权项:1.一种基于RPA-CRISPRCas13a检测肉毒杆菌的检测系统及试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括有预装干粉检测试剂;所述预装干粉检测试剂含有RPA-CRISPR-Cas13a混合体系,其中包含RPA扩增肉毒杆菌的特异性保守序列引物及Cas13a酶识别的crRNA及探针。所述RPA扩增的引物对包括正向引物RP-RD-F和反向引物RP-RD-R,所述正向引物RP-RD-F的序列如SEQIDNO.1所示:GAAATTAATACGACTCACTATAGGGGCCCAGATTTTACATTTGGTTTTGAGGAGTCAC,反向引物RP-RD-R的序列如SEQIDNO.2所示:TAATCTATGTCCAGCATGTATAAGTTCATGTGCTA;所述crRNA的序列如SEQIDNO.3所示:GAAATTAATACGACTCACTATAGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACCACCTAAAAGAGGATTTGTATCAACTTC;所述RNA探针为两端带有标记基团的单链RNA,序列为FAM-UUUUU-BHQ1,5'端修饰FMA荧光基团,3'端修饰BHQ1淬灭基团。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江大学 一种基于RPA-CRISPR/Cas13a体系的快速检测肉毒杆菌的试剂盒及应用

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