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申请/专利权人:山东科金生物发展有限公司
摘要:本发明提供了一种对干细胞分泌能力具有活化作用的组合物,属于干细胞技术领域。该组合物由不同分子量的景天三七多糖a和景天三七多糖c组成,实验结果表明景天三七多糖a或景天三七多糖c均能够有效的促进脐带间充质干细胞中bFGF、VEGF和SDF‑1α的基因表达和蛋白分泌,但促进的效果存在差异。同时,实验结果表明将景天三七多糖a和c联用后,能够对脐带间充质干细胞分泌bFGF、VEGF和SDF‑1α产生显著的协同效果。因此,本发明制备出用于提高脐带间充质干细胞分泌的培养基来有效的提高干细胞的分泌能力,从而更好的发挥干细胞的治疗效果。
主权项:1.一种组合物在制备提高脐带间充质干细胞分泌能力的细胞培养基中的应用,其特征在于,所述组合物由景天三七多糖a和景天三七多糖c组成,所述景天三七多糖a和所述景天三七多糖c的制备方法包括如下步骤:1将干燥处理后的景天三七原料粉碎成均匀的粉末,制备得到景天三七粉末;2将景天三七粉末和无菌水按照1g:10mL的比例混合,搅拌均匀后,调整温度为40℃,100w超声提取30min,制备得到景天三七混合液;3将景天三七混合液置于离心机中,离心,得到景天三七浸提液;4采用真空旋转蒸发的方式,将景天三七浸提液浓缩为原体积的25%,加入4倍量的无水乙醇,置于4℃进行24h醇沉,得到景天三七沉淀;5将得到的景天三七沉淀加入无菌水配置成景天三七溶液;6使用Sevage法进行5次重复去除景天三七溶液中的蛋白质,得到景天三七多糖溶液;7使用10kDa的超滤膜对景天三七多糖溶液进行过滤,得到小于10kDa的滤过液;8使用30kDa的超滤膜对截留液进行过滤,得到10kDa-30kDa的滤过液和大于30kDa的截留液;9将小于10kDa的滤过液,大于30kDa的截留液,加入无水乙醇使乙醇的终浓度为80%,4℃醇沉24h,冷冻干燥,得到所述景天三七多糖a和所述景天三七多糖c;所述组合物中所述景天三七多糖a和所述景天三七多糖c的质量比例为3:2,1:1或2:3。
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