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申请/专利权人：广东省农业科学院环境园艺研究所;佛山市农业科学研究所(佛山市农业技术推广中心)

摘要：本发明公开了一种火焰蝶兰组织培养快速繁殖及其育苗的方法。该方法包括外植体选取、外植体消毒、不定芽诱导、不定芽增殖、继代培养、生根培养和试管苗移栽的步骤。通过本发明培育出的火焰蝶兰种苗，其遗传性状稳定，保持了亲本的特性，具备包括不变性、投入少、产出高、周期短等诸多优势，可以实现规模化种苗生产。

主权项：1.一种火焰蝶兰组织培养快速繁殖及其育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：1外植体的选取：选取火焰蝶兰花梗，以冒出花蕾之前的花梗最佳，以带有腋芽的花梗茎段为外植体；2外植体的消毒：对花梗进行表面消毒并用无菌水清洗干净后，将花梗切割成2～3厘米长、中间带有腋芽的茎段，用消毒过的刀片除去花梗茎段上腋芽的外苞片，放入氯化汞溶液中浸泡灭菌8～10分钟，期间不断摇动，然后将花梗茎段取出并用无菌水冲洗3～5次，捞出后用无菌滤纸吸干花梗茎段上残余水分，用消毒过的刀片切去花梗茎段两端与消毒液接触的组织，得到消毒后的花梗茎段；3芽的诱导：将消毒后的花梗茎段接种到诱导培养基中培养30～50天，待芽点变绿增大，进行下一步的增殖培养，诱导培养基为12MS+6-BA0.5～1.0mgL+NAA0.1～0.3mgL+椰子汁10.00～20.0％+蔗糖30.0gL+琼脂7.0gL，pH值5.5-5.8；4芽的增殖：将诱导出的芽点切割下来，转接到增殖培养基中培养60～90天，获得丛生芽，增殖培养基为MS+6-BA1.0～1.5mgL+TDZ1.0～1.5mgL+椰子汁10.00～20.0％+蔗糖30.0gL+琼脂7.0gL，pH值5.5-5.8；5继代培养：将丛生芽转接到继代培养基中培养，获得继代苗，继代培养基为MS+6-BA1.0～1.5mgL+TDZ1.0～1.5mgL+椰子汁10.00～20.0％+蔗糖30.0gL+琼脂7.0gL，pH值5.5-5.8；6生根培养：对继代苗采用生根培养基进行生根培养90～120天，得到生根试管苗，生根培养基为12MS+NAA0.3～0.5mgL+活性炭0.5～1.0gL+椰子汁10.0～20.0％+蔗糖30.0gL+琼脂7.0gL，pH值5.5-5.8；7试管苗移栽：当试管苗达到叶数2～4片，叶长3～5cm，叶宽1～2cm，根长2～5cm，根数2～4条时，放到具自然光散射的温室中进行炼苗驯化，炼苗15～20天后出瓶移栽。

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