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申请/专利权人：哈尔滨象柏生物科技有限公司
摘要：一种提高L‑色氨酸产量的基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。为解决现有产L‑色氨酸菌株产量低、副产物乙酸导致发酵不稳定的问题，本发明以大肠杆菌为出发菌株，敲除pykF基因减少PYR的积累，以防其转变为有害副产物乙酸，以及减少前体PEP的损耗，同时异源表达pyc调节生长情况，整合pckA、异源表达xfpk串联pta增加色氨酸前体，敲除ackA，poxB减少乙酸含量，敲除mtr阻断色氨酸降解，并将其转到细胞内。本发明通过代谢工程的方法，构建了产生高浓度色氨酸的大肠杆菌，利用该菌株发酵生产L‑色氨酸的产量达55.4gL，转化率达23.78%，产酸减少，适合工业化生产L‑色氨酸。
主权项：1.一种提高L-色氨酸产量的基因工程菌株，其特征在于，是以保藏编号为CGMCCNO.11073的大肠杆菌（Escherichiacoli）为出发菌株，过表达丙酮酸羧化酶编码基因pyc，磷酸转酮酶编码基因Xfpk，磷酸乙酰转移酶编码基因pta和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶编码基因pckA，同时敲除丙酮酸激酶编码基因pykF，丙酮酸氧化酶编码基因poxB，乙酰激酶编码基因ackA和色氨酸特异性转运蛋白编码基因mtr获得；所述pyc来源于根瘤菌（RhizobiumFrank），经密码子优化获得，pyc的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示，Xfpk来源于双歧杆菌（Bifidobacterium），经密码子优化获得，Xfpk的核苷酸序列如SEQIDNO.32所示，pta，pckA，pykF，poxB，ackA和mtr均来源于保藏编号为CGMCCNO.11073的大肠杆菌，其中，pta的GeneID为946778，pckA的GeneID为886744，pykF的GeneID为946179，poxB的GeneID为946132，ackA的GeneID为946775，mtr的GeneID为947675。
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