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申请/专利权人：广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要：本发明提供了一种N末端B型钠尿肽前体NT‑proBNP荧光免疫层析试剂卡及其应用，包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；结合垫上含有生物素标记的NT‑proBNP抗体1#、AIE荧光微球同时标记的NT‑proBNP抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物；NT‑proBNP抗体1#和NT‑proBNP抗体2#识别NT‑proBNP抗原的不同表位；硝酸纤维素膜上含有包被链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线。所述试剂卡检测范围宽、灵敏度高、特异性好、检测快速简便，在人血清、血浆和全血样本中NT‑proBNP的含量检测中具有重要的应用前景。

主权项：1.一种N末端B型钠尿肽前体NT-proBNP荧光免疫层析试剂卡，其特征在于，所述试剂卡包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上含有生物素标记的NT-proBNP抗体1#、AIE荧光微球同时标记的NT-proBNP抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物；所述NT-proBNP抗体1#和NT-proBNP抗体2#识别NT-proBNP抗原的不同表位；所述硝酸纤维素膜上含有包被链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线；所述AIE荧光微球粒径为150~250nm；所述结合垫的制备包括：将生物素标记的NT-proBNP抗体1#、AIE荧光微球同时标记的NT-proBNP抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物分别用微球稀释液稀释；稀释后混合，稀释后的混合液中，生物素标记的NT-proBNP抗体1#的浓度为0.05mgmL，AIE荧光微球的浓度为0.3mgmL；用稀释后的混合液均匀喷涂两条线，喷涂线在结合垫上的液体用量为3μLcm；所述结合垫上AIE荧光微球的含量为1.8μgcm；所述AIE荧光微球与NT-proBNP抗体2#的质量比为20:1；所述AIE荧光微球与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物的质量比为200:1；所述检测线上链霉亲和素的含量为1μgcm；所述质控线上二硝基苯酚多克隆抗体的含量为1μgcm；所述样品垫的制备包括：所述样品垫上含有样品垫处理液，所述样品垫处理液为含0.0015mgmL抗红细胞抗体、0.2mgmL异嗜性抗体阻断剂、0.2%吐温20、2%BSA、2%蔗糖的0.02M、pH7.4的PBS；所述样品垫经样品垫处理液处理后，所述抗红细胞抗体的含量为1.17μgcm2；所述异嗜性抗体阻断剂的含量为156μgcm2；所述NT-proBNP抗体1#为来源于海肽生物的货号为4NT1cc，MabNT45的抗体；所述NT-proBNP抗体2#为来源于海肽生物的货号为4NT1cc，MabNT13的抗体；所述AIE荧光微球同时标记的NT-proBNP抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物采用如下步骤的方法制备得到：将活化的AIE荧光微球同时与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物和NT-proBNP单克隆抗体2#偶联。

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