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申请/专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院

摘要：本发明提供了一种金铂双壳的拉曼增强纳米标签、制备方法及在检测猴痘病毒中的应用，涉及新型纳米材料领域。本发明所述金铂双壳的拉曼增强纳米标签由内到外依次包括：Fe3O4内核、聚乙烯亚胺层、胶体金层、金壳层和铂壳层；其中，所述胶体金层连接有第一拉曼信号分子DTNB；其中，所述铂壳层连接有第二拉曼信号分子DTNB，且所述第二拉曼信号分子DTNB的末端羧基偶联猴痘病毒的捕获抗体。本发明所述金铂双壳的拉曼增强纳米标签集磁性、比色、催化和SERS活性于一体，具有磁响应性强、热点丰富、稳定性强、光学性能优异和类过氧化物酶催化活性高等优势，可用于检测猴痘病毒，提高了猴痘病毒检测的灵敏度和准确性。

主权项：1.一种金铂双壳的拉曼增强纳米标签的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：（1）将Fe3O4颗粒和聚乙烯亚胺溶液混合，进行超声处理，在所述Fe3O4颗粒的表面自组装形成聚乙烯亚胺层，得到Fe3O4@PEI纳米颗粒；（2）将所述Fe3O4@PEI纳米颗粒和胶体金溶液混合，进行超声处理，在所述聚乙烯亚胺层的表面通过静电吸附形成胶体金层，再经磁富集产物，得到Fe3O4-Au种子液；（3）将所述Fe3O4-Au种子液和DTNB溶液混合，进行超声处理，使DTNB通过Au-S键与所述胶体金层连接，得到Fe3O4-Au-DTNB种子液；（4）将所述Fe3O4-Au-DTNB种子液、金源、保护剂和还原剂混合，进行超声处理，反应形成金壳层，再经磁富集产物，得到MS纳米颗粒；（5）将所述MS纳米颗粒、铂源、还原剂混合，进行超声处理，在所述金壳层的表面沉积铂粒子形成铂壳层，再经磁富集产物，得到MS@Pt纳米颗粒；其中，所述还原剂包括硼氢化钠；（6）将所述MS@Pt纳米颗粒和DTNB溶液混合，进行超声处理，得到MS@Pt-DTNB纳米颗粒；（7）将所述MS@Pt-DTNB纳米颗粒、碳二亚胺溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液混合，进行活化反应，得到羧基活化的MS@Pt-DTNB纳米颗粒，再与猴痘病毒的捕获抗体混合，进行偶联反应，得到所述金铂双壳的拉曼增强纳米标签；其中，所述MS@Pt-DTNB纳米颗粒、碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的质量比为0.1~0.2:0.05~0.1:0.1~0.3；所述碳二亚胺包括1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺；所述活化反应的时间为10~30min；其中，所述偶联反应的具体步骤为：将羧基活化的MS@Pt-DTNB纳米颗粒重悬于缓冲溶液中，加入MPXVA29L抗体，室温下反应1~3h后，再加入牛血清白蛋白，室温下反应0.5~1.5h，经磁富集产物，得到金铂双壳的拉曼增强纳米标签；所述缓冲溶液包括PBST溶液；所述羧基活化的MS@Pt-DTNB纳米颗粒、猴痘病毒的捕获抗体和牛血清白蛋白质量比为0.1~0.2:0.01~0.02:5~15；所述金铂双壳的拉曼增强纳米标签由内到外依次包括：Fe3O4内核、聚乙烯亚胺层、胶体金层、金壳层和铂壳层；其中，所述胶体金层连接有第一拉曼信号分子DTNB；其中，所述铂壳层连接有第二拉曼信号分子DTNB，且所述第二拉曼信号分子DTNB的末端羧基偶联猴痘病毒的捕获抗体；其中，所述第一拉曼信号分子DTNB通过Au-S键连接于所述胶体金层；其中，所述第二拉曼信号分子DTNB通过Pt-S连接于所述铂壳层；其中，所述猴痘病毒的捕获抗体为MPXVA29L抗体。

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