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申请/专利权人:上海市农业科学院
摘要:本发明公开了一种猴头菌沪猴8号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,属于猴头菌菌种的检测领域,该引物组由10对基于猴头菌全基因组测序后开发的MNP标记引物组成,本发明的猴头菌‘沪猴8号’菌种MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定可用于猴头菌‘沪猴8号’菌种的特异性鉴定,具有准确性高、特异性强、可重复性好的优点,在收集的17个猴头菌菌种中猴头菌‘沪猴8号’菌种具有的专一性。
主权项:1.一种猴头菌沪猴8号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,其特征在于:具体步骤如下:1菌丝培养:将猴头菌菌丝转接到PDA平板上,25℃下避光培养,15d后收集菌丝;2基因组DNA的提取:用CTAB法提取上述菌丝的基因组DNA,紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和纯度,调整样品DNA的浓度为100~200nguL;3多重PCR扩增:将MNP标记引物组内的10对引物等量混合后对上述提取的DNA进行多重PCR扩增;4测序:将上述多重PCR的产物加上Illumina的测序接头和barcode并使用Illumina测序仪进行测序;5通过Illumina测序仪的测序结果来进行MNP标记基因型鉴定。
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