买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：中国人民解放军空军军医大学

摘要：本发明公开了一种具有口腔牙周炎症靶向和炎性中和功能的复合仿生纳米材料及其制备方法与应用，涉及生物医药技术领域，具体包含以下步骤：S1：低氧工程化处理人牙周膜干细胞；S2：功能化膜涂层的制备；S3：复合仿生纳米材料的制备。本发明的复合仿生纳米材料可用于靶向至牙周炎性区域、中和过度蓄积的毒力产物和细胞因子，改善过度炎症状态，促进牙周组织炎症控制和疾病治疗。

主权项：1.一种具有口腔牙周炎症靶向和炎性中和功能的复合仿生纳米材料的制备方法，其特征在于：具体包含以下步骤：S1：低氧工程化处理人牙周膜干细胞：S11：从临床收集的废弃的人第三磨牙或正畸牙牙根表面获取牙周膜组织，并分离培养牙周膜干细胞；S12：将P3-P5代的牙周膜干细胞放置于三气培养箱中进行低氧培养；S2：功能化膜涂层的制备：S21：提前准备细胞膜蛋白抽提试剂盒，取膜蛋白抽提试剂A，并在使用前加入蛋白酶抑制剂；S22：将低氧培养结束的牙周膜干细胞用冰PBS洗涤2遍，用细胞刮刮下细胞，直接离心收集细胞沉淀；S23：在冰上，按每2000万细胞加入1mL已加入蛋白酶抑制剂的膜蛋白抽提试剂A，轻轻吹散使细胞悬浮，得到细胞悬液；S24：将S23中细胞悬液放于液氮中进行速冻，再37℃解冻，取细胞悬液进行台盼蓝染色以检测细胞破碎程度，细胞破碎程度大于80%时停止冻融；S25：将S24中停止冻融后的细胞悬液于4℃，700g下离心10min收集上清，得到含有细胞膜碎片的溶液，接着在4℃，16000g离心30min，弃去上清取沉淀，得到细胞膜蛋白；S26：用EDTA溶液重悬细胞膜蛋白，4℃超声分散，-80℃保存；S3：复合仿生纳米材料的制备：S31：将步骤S26得到的细胞膜蛋白与中空介孔二氧化锰纳米颗粒水溶液混合均匀，得到细胞膜二氧化锰纳米颗粒混合溶液，装入脂质体挤出器中；S32：使用脂质体挤出器挤压步骤S31得到的细胞膜二氧化锰纳米颗粒混合溶液，依次通过400nm、200nm的聚碳酸酯膜，反复挤压20~25个循环，使纳米颗粒被细胞膜蛋白充分包被，得到细胞膜包被二氧化锰纳米颗粒混合溶液；S33：将步骤S32得到的细胞膜包被二氧化锰纳米颗粒混合溶液在超声条件下进行处理，离心，洗涤得到复合仿生纳米材料。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国人民解放军空军军医大学 一种具有口腔牙周炎症靶向和炎性中和功能的复合仿生纳米材料及其制备方法与应用