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一种抗人肾损伤分子-1单克隆抗体的制备方法及其应用 

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申请/专利权人:浙江工业大学

摘要:本发明涉及生物医学技术领域,公开了一种抗人肾损伤分子‑1单克隆抗体的制备方法及其应用。本发明通过特定重组人肾损伤分子‑1作为抗原,刺激小鼠产生分泌抗人肾损伤分子‑1单克隆抗体的B细胞,然后将之与骨髓瘤细胞SP20融合,通过杂交瘤技术制备得到能稳定分泌肾损伤分子‑1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞株能分泌高亲和力的肾损伤分子‑1单克隆抗体,其能特异性结合于重组人肾损伤分子‑1,也能特异性结合于人尿液中天然肾损伤分子‑1,具有特异性好、结合率高的特点,可以广泛应用于免疫法检测人尿液以及血清中肾损伤分子‑1含量。

主权项:1.一种抗人肾损伤分子-1单克隆抗体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)将重组人肾损伤分子-1作为抗原免疫小鼠,使小鼠产生抗体,分离小鼠脾细胞,得到能分泌抗人肾损伤分子-1单克隆抗体的B细胞;其中,重组人肾损伤分子-1的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示;(2)将骨髓瘤细胞SP20与步骤(1)得到的B细胞融合,筛选出分泌抗人肾损伤分子-1单克隆抗体的杂交瘤细胞,并采用有限稀释法将细胞进行克隆,筛选出经过两次亚克隆的稳定分泌肾损伤分子-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株;(3)将步骤(2)制备得到的杂交瘤细胞株接种培养,收集细胞,注入小鼠腹腔,8~12天后,抽取小鼠腹水,从小鼠腹水中分离得到抗人肾损伤分子-1单克隆抗体。

全文数据:

权利要求:

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