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申请/专利权人：石家庄和亚生物技术有限公司
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体地说，涉及一种近平滑念珠菌烯醇化酶重组蛋白的制备方法及其应用。所述重组蛋白的制备方法，包括以下步骤：1、重组Cp‑Eno基因的获取和质粒构建；2、转化：取重组的PET30a载体转化RosettaDE3感受态；3、诱导表达融合蛋白；4、蛋白的纯化。本发明所述的近平滑念珠菌烯醇化酶重组蛋白可诱导小鼠产生相应抗体，进一步优化可用于临床近平滑念珠菌早期感染的抗体检测，对于近平滑念珠菌感染的研究具有重要价值，为临床诊断近平滑念珠菌提供了新的可能。
主权项：1.一种近平滑念珠菌烯醇化酶重组蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）重组Cp-Eno基因的获取和质粒构建：选用Genebank中登记的序列号为CCE43078.1的序列为Cp-Eno基因模板，通过体外人工合成双链DNA分子技术获得目的基因；目的基因经过酶切、连接后，构建pET-30a（+）-Cp-Eno重组质粒，即得到重组表达载体；（2）转化：取重组的PET30a载体转化RosettaDE3感受态；（3）诱导表达融合蛋白：挑取表达菌株RosettaDE3的单菌置于LB培养基中过夜培养；将过夜培养的菌液接种于LB培养基中，添加诱导剂，过夜培养；离心后，收集菌体；（4）蛋白的纯化：将收集的细菌菌体用破碎Buffer溶解，冰浴中超声破碎菌体；离心后，收集上清进行纯化，得到重组蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 石家庄和亚生物技术有限公司 一种近平滑念珠菌烯醇化酶重组蛋白的制备及其应用
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