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重组质粒、构建方法及μ-芋螺毒素肽的原核表达方法 

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申请/专利权人:内蒙古驰影医疗设备有限公司;广西大学

摘要:本发明公开了一种重组质粒、构建方法及μ‑芋螺毒素肽的原核表达方法。一种用于μ‑芋螺毒素肽原核表达的重组质粒的构建方法包括以下步骤:1)将μ‑芋螺毒素肽的氨基酸序列进行改造;2)将改造后的氨基酸序列进行密码子优化,得到优化后的碱基序列;3)根据碱基序列进行基因合成,并克隆到载体上,得到合成质粒;4)将合成质粒经过大肠杆菌进行转化,获得转化质粒;5)将转化质粒通过第一引物、第二引物和第三引物扩增,获得扩增目标产物;6)将线性化的合成质粒和扩增目标产物进行同源重组,得到同源重组产物;将同源重组产物转化到大肠杆菌中,得到重组质粒。本发明的重组质粒有利于μ‑芋螺毒素肽的原核表达。

主权项:1.一种用于μ-芋螺毒素肽原核表达的重组质粒的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将μ-芋螺毒素肽的氨基酸序列进行改造,改造后的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示;2)将改造后的氨基酸序列进行密码子优化,得到优化后的碱基序列,该碱基序列如SEQIDNO:2所示;3)根据步骤2)所得的碱基序列进行基因合成,并克隆到载体上,得到合成质粒;4)将步骤3)所得的合成质粒经过大肠杆菌进行转化,获得转化质粒;5)将步骤4)所得的转化质粒通过第一引物、第二引物和第三引物扩增,获得扩增目标产物;其中,第一引物的序列如SEQIDNO:3所示,第二引物的序列如SEQIDNO:4所示,第三引物的序列如SEQIDNO:5所示;6)将线性化的合成质粒和步骤5)所得的扩增目标产物进行同源重组,得到同源重组产物;将同源重组产物转化到大肠杆菌中,得到重组质粒。

全文数据:

权利要求:

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