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一种不通过愈伤途径直接芽再生的枣植株高效转化方法 

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申请/专利权人:河北农业大学

摘要:本发明公开了一种不通过愈伤途径直接芽再生的枣植株高效转化方法,属于生物细胞工程及生物分子技术领域,提供的一种不通过愈伤途径直接芽再生的枣植株高效转化方法:选取酸枣组培苗中上部的叶片,垂直于主叶脉造成创口,预培养得预处理叶片;浸没于农杆菌菌液中,浸染,得浸染后的叶块,转移到共培养培养基中,黑暗培养得共培养的叶块;转移至选择筛选培养基1中,培养,转移至选择筛选培养基2中,培养至分化出抗性芽;去除抗性芽底部原生叶片,置于选择筛选培养基2中,培养得再生芽,接种于12MS培养基进行生根培养,得再生植株。本发明所述方法具有转化效率高,成本低,应用范围广可充分满足枣基因功能验证研究,具有重要的应用价值。

主权项:1.一种不通过愈伤途径直接芽再生的枣植株高效转化方法,其特征在于,包括以下步骤:1选取酸枣组培苗中上部的叶片,垂直于主叶脉造成2~4个创口,正面朝下接种于基础培养基,预培养2~3d,得预处理叶片;2将所述预处理叶片浸没于农杆菌菌液中,浸染,得浸染后的叶块,转移到共培养培养基中,黑暗培养2~3d,得共培养的叶块;3将所述共培养的叶块转移至选择筛选培养基1中,第一组织培养3~5d后,转移至选择筛选培养基2中,第二组织培养至分化出抗性芽;4去除所述抗性芽底部原生叶片,置于选择筛选培养基2中,第三组织培养,得再生芽,接种于12MS培养基进行生根培养,得再生植株。

全文数据:

权利要求:

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